La necessità per il test del DNA residuo di E. coli
In campi come la terapia cellulare e genica, i plasmidi virali sono amplificati e fermentati usando E. coli come ospite. Il plasmide amplificato deve essere sottoposto al controllo della qualità del DNA residuo di E. Coli prima di poter essere utilizzato per infettare 293 cellule e impacchettare il virus. Pertanto, il rilevamento del DNA residuo di E. coli è fondamentale.
Requisiti normativi e metodi di test
Le attuali linee guida della FDA dell'OMS e degli Stati Uniti raccomandano il DNA residuo nei prodotti finiti di non essere superiore a 10 ng/agente e la FDA statunitense afferma anche che il DNA residuo nelle cellule ospiti dei biologici non dovrebbe essere maggiore di 100 pg/agente. I principi generali della farmacopoeia europea prevedono che il limite del DNA residuo nei prodotti biologici non dovrebbe essere maggiore di 10 ng/dose, ma il limite di DNA residuo per alcuni vaccini particolari è più rigoroso, ad esempio il DNA residuo nel vaccino inattivato contro l'epatite A non dovrebbe essere più alto di 100 PG e che in epatite BA PG/Dose. L'edizione 2020 della farmacopea cinese, parte III, stabilisce che il residuo di DNA nei preparati biologici prodotti su una matrice cellulare non dovrebbe superare i 100 pg/dose e il residuo di DNA nei vaccini prodotti su una matrice batterica o fungina non deve superare 10 ng/dose.
Inoltre, per i metodi di determinazione esogena del residuo di DNA, le farmacopoeia nazionali forniscono anche raccomandazioni di orientamento. L'edizione USP40 - NF35 USP40 - NF35 Descrive tre metodi per la determinazione dei residui di DNA esogeni, che sono l'ibridazione della sonda del DNA, il metodo di soglia e il metodo PCR quantitativo reale. La farmacopea europea propone PCR quantitativa reale e metodo immunoenzimatico, due metodi analitici sensibili per quantificare il DNA residuo delle cellule ospiti. La versione cinese Pharmacopeia 2020 delle tre regole generali 3407 stabilisce anche che i metodi di rilevamento dei residui del DNA delle cellule ospiti sono ibridazione della sonda del DNA, colorazione a fluorescenza e PCR quantitativa.
Tra questi, il metodo QPCR ha una sensibilità estremamente elevata, specificità e accuratezza della sequenza, che può fornire un mezzo affidabile di rilevamento per l'industria biofarmaceutica nella ricerca di processo e nel controllo di qualità dei prodotti finiti, ed è ora diventato il metodo di rilevamento preferito per ciascun produttore di biologiche.
Informazioni sui prodotti Bluekit
Caratteristiche del prodotto
Rilevamento rapido, forte specificità, prestazioni affidabili, il limite di rilevamento più basso può raggiungere il livello "FG".
Parametri del prodotto
- Intervallo di rilevamento: 3,00 × 101 ~ 3,00 × 105fg/μl
- Limite di quantificazione ：00 × 101fg/μl
- Limite di rilevamento ：00 fg/μl
- Precisione: CV% ≤ 15%.
Problemi di rilevamento comuni e precauzioni
1. Questo kit è solo per uso di ricerca in vitro, non per la diagnosi clinica.
2. Il kit deve essere utilizzato entro il periodo di validità.
3. Si consiglia di fusioni tutti i componenti del kit in un ambiente a bassa temperatura e quindi utilizzati.
4. Solo rigorosamente rispettare le istruzioni del metodo operativo, tutto l'uso del kit di supporto ai reagenti per garantire il miglior effetto di rilevamento.
5. Presta attenzione alle diverse fasi di campionamento in modo tempestivo per sostituire la punta, per evitare la contaminazione incrociata, evitare di aprire il coperchio per lungo tempo.
6. I risultati del test finale possono essere significativamente influenzati dall'efficacia dei reagenti, dai metodi operativi dell'operatore e dall'ambiente di test.
Consultazione del prodotto
Telefono: +86 - 18013115357
E-mail:info@hillgene.com
Tempo post: 2024 - 01 - 11 10:31:30
