大腸菌残留DNA検査の必要性
細胞治療や遺伝子治療などの分野では、大腸菌を宿主としてウイルスプラスミドが増幅・発酵されます。増幅されたプラスミドは、293 細胞への感染とウイルスのパッケージングに使用する前に、大腸菌残留 DNA の品質管理を受ける必要があります。したがって、大腸菌残留 DNA の検出は重要です。
規制要件と試験方法
現在の WHO および米国 FDA のガイドラインでは、最終製品中の残留 DNA が薬剤あたり 10 ng 以下であることを推奨しており、米国 FDA も生物製剤の宿主細胞中の残留 DNA が薬剤あたり 100 pg 以下であるべきであると述べています。欧州薬局方の一般原則では、生物学的製剤中の残留 DNA の制限は 1 回あたり 10 ng を超えてはいけないと規定していますが、一部の特定のワクチンの残留 DNA 制限はより厳しく、たとえば、A 型肝炎に対する不活化ワクチンの残留 DNA は 100 pg/回を超えてはならず、B 型肝炎に対するワクチンの残留 DNA は 10 pg/回を超えてはなりません。 2020 年版中国薬局方第 III 部では、細胞マトリックス上で製造された生物学的製剤中の DNA 残基は 1 回あたり 100 pg を超えてはならず、細菌または真菌マトリックス上で製造されたワクチン中の DNA 残基は 10 ng/回を超えてはならないと規定しています。
さらに、外因性 DNA 残基の決定方法については、各国の薬局方でも推奨ガイダンスが提供されています。米国薬局方 2017 年版 USP40-NF35 一般規定 1130 には、外因性 DNA 残基を決定するための 3 つの方法、つまり DNA プローブハイブリダイゼーション、閾値法およびリアルタイム定量的 PCR 法が記載されています。欧州薬局方は、宿主細胞残留DNAを定量するための2つの高感度分析法であるリアルタイム定量PCRおよび免疫酵素法を提案している。中国薬局方 2020 年版の 3 つの一般規則 3407 では、宿主細胞 DNA 残基の検出方法が DNA プローブハイブリダイゼーション、蛍光染色、および定量的 PCR であることも規定されています。
中でも、qPCR 法は感度、配列特異性、精度が非常に高く、バイオ医薬品業界のプロセス研究や最終製品の品質管理において信頼性の高い検出手段を提供することができ、現在では各生物製剤メーカーにとって推奨される検出法となっています。
Bluekit 製品に関する情報
製品の特徴
迅速な検出、強力な特異性、信頼性の高い性能、検出下限は「fg」レベルに達します。
製品パラメータ
- 検出範囲：3.00×101～3.00×105fg/μL
- 定量限界：00×101fg/μL
- 検出限界：00 fg/μL
- 精度: CV% ≤ 15%。
一般的な検出の問題と注意事項
1. このキットはインビトロ研究専用であり、臨床診断用ではありません。
2. キットは有効期限内に使用する必要があります。
3. キット内のすべてのコンポーネントは、低温環境で溶かしてから使用することをお勧めします。
4. 最高の検出効果を保証するために、操作方法、キットサポート試薬のすべての使用の指示にのみ厳密に従ってください。
5. さまざまなサンプリング手順に注意を払い、適時にチップを交換し、クロスコンタミネーションを回避し、長時間蓋を開けることを避けてください。
6. 最終的なテスト結果は、試薬の有効性、オペレーターの操作方法、テスト環境によって大きく影響される可能性があります。
製品に関するご相談
電話: +86-18013115357
電子メール:info@hillgene.com
投稿時間: 2024-01-11 10:31:30
