La necesidad de realizar pruebas de ADN residual de E. coli
En campos como la terapia celular y genética, los plásmidos virales se amplifican y fermentan utilizando E. coli como huésped. El plásmido amplificado debe someterse a un control de calidad del ADN residual de E. coli antes de poder usarse para infectar 293 células y empaquetar el virus. Por tanto, la detección del ADN residual de E. coli es fundamental.
Requisitos reglamentarios y métodos de prueba
Las pautas actuales de la OMS y la FDA de EE. UU. recomiendan que el ADN residual en los productos terminados no sea superior a 10 ng/agente, y la FDA de EE. UU. también establece que el ADN residual en las células huésped de productos biológicos no debe ser superior a 100 pg/agente. Los Principios Generales de la Farmacopea Europea estipulan que el límite de ADN residual en productos biológicos no debe ser superior a 10 ng/dosis, pero el límite de ADN residual para algunas vacunas particulares es más estricto, por ejemplo, el ADN residual en la vacuna inactivada contra la hepatitis A no debe ser superior a 100 pg/dosis, y el de la vacuna contra la hepatitis B no debe ser superior a 10 pg/dosis. La edición de 2020 de la Farmacopea China, Parte III, estipula que el residuo de ADN en preparaciones biológicas producidas en una matriz celular no debe exceder los 100 pg/dosis, y el residuo de ADN en las vacunas producidas en una matriz bacteriana o fúngica no debe exceder los 10 ng/dosis.
Además, para los métodos de determinación de residuos de ADN exógeno, las farmacopeas nacionales también ofrecen recomendaciones orientativas. La edición 2017 de la Farmacopea de EE. UU. de la Disposición general 1130 de USP40-NF35 describe tres métodos para la determinación de residuos de ADN exógeno, que son la hibridación de sondas de ADN, el método de umbral y el método de PCR cuantitativa en tiempo real. La Farmacopea Europea propone la PCR cuantitativa en tiempo real y el método inmunoenzimático, dos métodos analíticos sensibles para cuantificar el ADN residual de la célula huésped. La versión 2020 de las tres reglas generales 3407 de la Farmacopea China también estipula que los métodos de detección de residuos de ADN de la célula huésped son la hibridación de sondas de ADN, la tinción fluorescente y la PCR cuantitativa.
Entre ellos, el método qPCR tiene una sensibilidad, especificidad de secuencia y precisión extremadamente altas, lo que puede proporcionar un medio de detección confiable para la industria biofarmacéutica en la investigación de procesos y el control de calidad de productos terminados, y ahora se ha convertido en el método de detección preferido para cada fabricante de productos biológicos.
Información sobre los productos Bluekit
Características del producto
Detección rápida, fuerte especificidad, rendimiento confiable, el límite de detección más bajo puede alcanzar el nivel "fg".
Parámetros del producto
- Rango de detección: 3,00×101 ~3,00×105fg/μL
- Límite de cuantificación:00×101fg/μL
- Límite de detección:00 fg/μL
- Precisión: CV% ≤ 15%.
Precauciones y problemas de detección comunes
1. Este kit es únicamente para uso en investigación in vitro, no para diagnóstico clínico.
2. El kit debe utilizarse dentro del período de validez.
3. Se recomienda fundir todos los componentes del kit en un ambiente de baja temperatura y luego utilizarlos.
4. Cumpla estrictamente con las instrucciones del método de operación y utilice todos los reactivos de soporte del kit para garantizar el mejor efecto de detección.
5. Preste atención a los diferentes pasos de muestreo de manera oportuna para reemplazar la punta, para evitar la contaminación cruzada, evite abrir la tapa durante mucho tiempo.
6. Los resultados finales de la prueba pueden verse afectados significativamente por la eficacia de los reactivos, los métodos operativos del operador y el entorno de la prueba.
Consulta de producto
Teléfono: +86-18013115357
Correo electrónico:info@hillgene.com
Hora de publicación: 2024-01-11 10:31:30
