A necessidade para o teste de DNA residual de e.coli
Em campos como terapia celular e genética, os plasmídeos virais são amplificados e fermentados usando E. coli como hospedeiro. O plasmídeo amplificado precisa sofrer o controle de qualidade do DNA residual de e.coli antes de ser usado para infectar 293 células e embalar o vírus. Portanto, a detecção do DNA residual de e.coli é crítica.
Requisitos regulatórios e métodos de teste
As diretrizes atuais da OMS e da FDA dos EUA recomendam o DNA residual em produtos acabados para não ser maior que 10 ng/agente, e o FDA dos EUA também afirma que o DNA residual nas células hospedeiras de biológicos não deve ser superior a 100 pg/agente. The General Principles of the European Pharmacopoeia stipulates that the limit of residual DNA in biological products should not be greater than 10 ng/dose, but the residual DNA limit for some particular vaccines is more stringent, e.g., the residual DNA in the inactivated vaccine against hepatitis A should not be higher than 100 pg/dose, and that in the vaccine against hepatitis B should not be higher than 10 PG/dose. A edição de 2020 da farmacopeia chinesa, parte III, estipula que o resíduo de DNA nas preparações biológicas produzidas em uma matriz celular não deve exceder 100 pg/dose, e o resíduo de DNA em vacinas produzidas em uma matriz bacteriana ou fúngica não deve exceder 10 ng/dose.
Além disso, para os métodos de determinação exógena de resíduos de DNA, as farmacopeias nacionais também fornecem recomendações de orientação. A edição de Farmacopeia dos EUA 2017 do USP40 - NF35 Provisão Geral 1130 descreve três métodos para a determinação de resíduos de DNA exógenos, que são hibridação da sonda de DNA, método de limiar e método real de PCR quantitativo. A farmacopeia européia propõe real - PCR quantitativa do tempo e método imunoenzimático, dois métodos analíticos sensíveis para quantificar o DNA residual de células hospedeiras. A versão chinesa de farmacopeia 2020 das três regras gerais 3407 também estipula que os métodos de detecção de resíduos de DNA de célula hospedeira são hibridação da sonda de DNA, coloração com fluorescência e PCR quantitativa.
Entre eles, o método QPCR possui alta sensibilidade, especificidade e precisão de sequência, que podem fornecer um meio confiável de detecção para a indústria biofarmacêutica na pesquisa de processos e controle de qualidade dos produtos acabados, e agora se tornou o método de detecção preferido para cada fabricante de biologia.
Informações sobre produtos Bluekit
Recursos do produto
Detecção rápida, forte especificidade, desempenho confiável, o menor limite de detecção pode atingir o nível "FG".
Parâmetros do produto
- Faixa de detecção: 3,00 × 101 ~ 3,00 × 105fg/μl
- Limite de quantificação:00 × 101fg/μl
- Limite de detecção:00 FG/μL
- Precisão: CV% ≤ 15%.
Problemas comuns de detecção e precauções
1. Este kit é apenas para uso de pesquisa in vitro, não para diagnóstico clínico.
2. O kit deve ser usado dentro do período de validade.
3. Todos os componentes do kit são recomendados para serem derretidos em um ambiente de baixa temperatura e depois usados.
4. Somente cumpre estritamente as instruções do método de operação, todo o uso dos reagentes de suporte do kit para garantir o melhor efeito de detecção.
5. Preste atenção às diferentes etapas de amostragem em tempo hábil para substituir a ponta, para evitar a contaminação cruzada, evite abrir a tampa por um longo tempo.
6. Os resultados do teste final podem ser significativamente impactados pela eficácia dos reagentes, pelos métodos operacionais do operador e pelo ambiente de teste.
Consulta do produto
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Hora da postagem: 2024 - 01 - 11 10:31:30
