Pichia pastoris hcp (proteína de célula hospedeira) kit de detecção residual

Pichia pastoris hcp (proteína de célula hospedeira) kit de detecção residual

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Um - Protocolo ELISA de um passo - Economiza tempo (<2H TOTAL DE ENSAIO TEMPO)
Pichia pastoris - específico - Sem reatividade cruzada com CHO/HCPS
Pronto - para - Use - Nenhuma amostra de pré -tratamento necessária
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Visão geral
Protocolos
Especificações
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Uso pretendido
Este kit foi projetado para a detecção quantitativa de resíduos de proteína celular (HCP) em produtos biofarmacêuticos derivados de Pichia pastoris cepas (por exemplo, GS115, x33), usando um ensaio imunossorvente de um - etapa - Somente para uso da pesquisa. Não para fins de diagnóstico.


Princípio da detecção

O kit emprega um Sandwich Elisa método:

  1. Revestimento: Os poços de microplacas são pré -revestidos com anticorpos policlonais de ovinos contra Pichia pastoris HCPS.

  2. Incubação: Amostras/calibradores são adicionados, seguidos por HRP - Anti -policlonal de ovelha conjugado -Pichia pastoris Anticorpos HCP.

  3. Detecção: Após a lavagem, o substrato TMB é adicionado para o desenvolvimento de cores. A reação é interrompida e a absorvância é medida em 450 nm.

  4. Quantificação: A concentração de HCP é calculada a partir da curva padrão (concentração de absorvância ∝ HCP).


Principais recursos

  • Nenhuma amostra de pré -tratamento necessária (apenas a validação de diluição necessária).

  • Protocolo simplificado: Etapas mínimas, resultados rápidos (<2 horas).

  • Alta especificidade e confiabilidade: Otimizado para Pichia pastoris HCPS.


Notas técnicas

  • Amostras compatíveis: Sobrenadantes da cultura de células, biológicos purificados.

  • Faixa dinâmica: 1–100 ng/ml (típico).

  • Alinhamento regulatório: Adequado para o desenvolvimento de processos e testes de liberação de lote GMP.

    Processo de uso

    1. Equilibração

    • Traga todos os componentes para a temperatura ambiente (≥20 min).


    2. Adição de amostra/anticorpo

    • Adicione amostras/calibradores: 100 µl/poço

    • Adicionar 1x enzima - anticorpo conjugado: 100 µl/poço (ver legenda ①)


    3. Incubação

    • Incubar na RT, protegido da luz, 600 rpm por 3 h (ver legenda ③)


    4. Lavagem

    • Lavar 1: 300 µl/poço 1x tampão (posição da placa vertical)

    • Lavagem 2 - 5: 300 µl/poço 1x tampão, 5 lavagens totais

    • Pat seco: Após a lavagem final, inverta a placa em papel absorvente


    5. Desenvolvimento de substrato TMB

    • Adicione TMB: 100 µl/poço

    • Desenvolver: 10 min na RT (protegido da luz)


    6. Pare de reação e leitura

    • Adicione a solução de parada: 50 µl/poço

    • Ficar: 5 min

    • Ler: OD a 450 nm (referência 620 nm)

     


O que está na caixa?
Componente Número do produto Especificação Descrição
Microplaca anti - Pichia HCP pré -revestida PNA015 8 poços × 12 tiras Pré -- revestido com ovelhas policlonais anti -Pichia pastoris Anticorpos HCP. Selado em bolsas de papel alumínio com dessecante. Armazene protegido da luz.
Calibrador Pichia HCP PNB015 2 frascos Pó liofilizado. Reconstitua com diluente calibrador de 500 μL (PNC002). Permitir 5 a 10 minutos para dissolução (a solução deve ser clara). Armazene protegido da luz.
Diluente do calibrador PNC002 1,5 ml × 1 tubo Solução clara para reconstituir o calibrador Pichia HCP.
Diluente de ensaio PNE006 25 ml × 2 garrafas Para diluir calibradores, amostras e anticorpo conjugado enzimático - Valide o fator de diluição ideal para novas amostras.
Tampão de lavagem (concentrado 10 ×) PNF001 25 ml × 2 garrafas Para lavagem de placas. Os cristais podem se formar em baixas temperaturas - dissolver a 37 ° C antes do uso. Dilua 10 × com água ultrapura.
HRP - anticorpo anti - Pichia HCP (100 ×) conjugado (100 ×) PNN009 120 μl × 1 tubo Anticorpo policlonal de ovelha. Diluta 100 × com diluente de ensaio antes do uso. Armazene protegido da luz.
Substrato TMB PND004 12 ml × 1 garrafa Equilibre à temperatura ambiente (≥20 min) antes do uso. Armazene protegido da luz.
Solução de parada PNI002 6 ml × 1 garrafa Contém hcl. Use óculos de óculos e evite o contato da pele.
Filmes de vedação PNK001 3 folhas Para cobrir tiras de microplacas para evitar contaminação e evaporação.
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Informações de envio

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Política de captação de pacotes

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