Sự cần thiết cho xét nghiệm DNA dư E.coli
Trong các lĩnh vực như liệu pháp tế bào và gen, các plasmid virus được khuếch đại và lên men bằng E. coli làm vật chủ. Plasmid được khuếch đại cần phải trải qua kiểm soát chất lượng DNA còn lại của E.coli trước khi nó có thể được sử dụng để lây nhiễm 293 tế bào và đóng gói virus. Do đó, việc phát hiện DNA dư E.coli là rất quan trọng.
Yêu cầu quy định và phương pháp kiểm tra
Các hướng dẫn hiện tại của WHO và FDA của FDA khuyến nghị DNA còn lại trong các sản phẩm hoàn chỉnh không lớn hơn 10 ng/tác nhân và FDA Hoa Kỳ cũng nói rằng DNA còn lại trong các tế bào vật chủ của sinh học không lớn hơn 100 pg/tác nhân. Các nguyên tắc DNA còn lại của Da châu Âu quy định rằng giới hạn DNA còn lại trong các sản phẩm sinh học không nên lớn hơn 10 ng/liều, nhưng giới hạn DNA còn lại đối với một số loại vắc -xin cụ thể nghiêm ngặt hơn, ví dụ, DNA còn lại trong vắc -xin hepat A không nên cao hơn. pg/liều. Phiên bản 2020 của dược điển Trung Quốc, Phần III, quy định rằng dư lượng DNA trong các chế phẩm sinh học được tạo ra trên một ma trận tế bào không được vượt quá 100 pg/liều và dư lượng DNA trong vắc -xin được tạo ra trên ma trận vi khuẩn hoặc nấm không quá 10 ng/liều.
Ngoài ra, đối với các phương pháp xác định dư lượng DNA ngoại sinh, dược điển quốc gia cũng đưa ra các khuyến nghị hướng dẫn. Phiên bản Pharmacopoeia 2017 của Hoa Kỳ của USP40 - NF35 Quy định chung 1130 mô tả ba phương pháp để xác định dư lượng DNA ngoại sinh, là phương pháp lai đầu dò DNA, phương pháp ngưỡng và phương pháp PCR định lượng thời gian thực. Pharmacopoeia châu Âu đề xuất phương pháp PCR định lượng thực sự - thời gian và phương pháp miễn dịch, hai phương pháp phân tích nhạy cảm để định lượng DNA dư tế bào chủ. Phiên bản Pharmacopoeia 2020 của Trung Quốc của ba quy tắc chung 3407 cũng quy định rằng các phương pháp phát hiện dư lượng DNA của tế bào chủ là lai tạo DNA, nhuộm huỳnh quang và PCR định lượng.
Trong số đó, phương pháp qPCR có độ nhạy cực cao, độ đặc hiệu và độ chính xác của trình tự, có thể cung cấp một phương tiện phát hiện đáng tin cậy cho ngành công nghiệp dược phẩm sinh học trong nghiên cứu quy trình và kiểm soát chất lượng của các sản phẩm hoàn chỉnh, và giờ đây nó đã trở thành phương pháp phát hiện ưa thích cho mỗi nhà sản xuất sinh học.
Thông tin về các sản phẩm Bluekit
Tính năng sản phẩm
Phát hiện nhanh, tính đặc hiệu mạnh mẽ, hiệu suất đáng tin cậy, giới hạn phát hiện thấp nhất có thể đạt đến cấp độ FG FG.
Thông số sản phẩm
- Phạm vi phát hiện: 3,00 × 101 ~ 3,00 × 105fg/μl
- Giới hạn định lượng ：00 × 101fg/μl
- Giới hạn phát hiện ：00 fg/μl
- Độ chính xác: CV% 15%.
Các vấn đề và biện pháp phòng ngừa phát hiện phổ biến
1. Bộ này chỉ dành cho sử dụng nghiên cứu in vitro, không phải để chẩn đoán lâm sàng.
2. Bộ dụng cụ phải được sử dụng trong khoảng thời gian hiệu lực.
3. Tất cả các thành phần trong bộ được khuyến nghị sẽ được nấu chảy trong môi trường nhiệt độ thấp và sau đó được sử dụng.
4. Chỉ tuân thủ nghiêm ngặt các hướng dẫn của phương pháp hoạt động, tất cả việc sử dụng các thuốc thử hỗ trợ bộ dụng cụ để đảm bảo hiệu ứng phát hiện tốt nhất.
5. Hãy chú ý đến các bước lấy mẫu khác nhau một cách kịp thời để thay thế đầu, để tránh bị ô nhiễm chéo, tránh mở nắp trong một thời gian dài.
6. Kết quả thử nghiệm cuối cùng có thể bị ảnh hưởng đáng kể bởi hiệu quả của thuốc thử, phương pháp vận hành của nhà điều hành và môi trường thử nghiệm.
Tư vấn sản phẩm
Điện thoại: +86 - 18013115357
E-mail:info@hillgene.com
Thời gian đăng: 2024 - 01 - 11 10:31:30
