Nödvändigheten av e.coli resterande DNA -testning
I fält såsom cell- och genterapi amplifieras och fermenteras virala plasmider med användning av E. coli som värd. Den amplifierade plasmiden måste genomgå E.coli kvarvarande DNA -kvalitetskontroll innan den kan användas för att infektera 293 celler och paketera viruset. Därför är detekteringen av e.coli rest DNA kritisk.
Regleringskrav och testmetoder
Aktuella WHO och US FDA -riktlinjer rekommenderar rest DNA i färdiga produkter för att inte vara större än 10 ng/agent, och USA säger också att rest DNA i värdceller för biologik bör inte vara större än 100 pg/medel. The General Principles of the European Pharmacopoeia stipulates that the limit of residual DNA in biological products should not be greater than 10 ng/dose, but the residual DNA limit for some particular vaccines is more stringent, e.g., the residual DNA in the inactivated vaccine against hepatitis A should not be higher than 100 pg/dose, and that in the vaccine against hepatitis B should not be higher than 10 PG/DOSE. 2020 -utgåvan av den kinesiska farmakopoeia, del III, föreskriver att DNA -rest i biologiska beredningar som produceras på en cellulär matris inte bör överstiga 100 pg/dos, och DNA -rest i vacciner som produceras på en bakteriell eller svampmatris bör inte överskrida 10 ng/dos.
För metoderna för exogen DNA -restbestämning ger nationella farmakopoier också vägledning rekommendationer. U.S. Pharmacopoeia 2017 -utgåvan av USP40 - NF35 Allmän bestämmelse 1130 beskriver tre metoder för bestämning av exogena DNA -rester, som är DNA -sondhybridisering, tröskelmetod och verklig kvantitativ PCR -metod. Den europeiska farmakopoeia föreslår verklig kvantitativ PCR och immunoenzymatisk metod, två känsliga analysmetoder för att kvantifiera värdcellens resterande DNA. Den kinesiska Pharmacopoeia 2020 -versionen av de tre allmänna reglerna 3407 föreskriver också att värdcellens DNA -restmetoder är DNA -sondhybridisering, fluorescensfärgning och kvantitativ PCR.
Bland dem har qPCR -metoden extremt hög känslighet, sekvensspecificitet och noggrannhet, som kan ge ett tillförlitligt sätt att upptäcka för biofarmaceutiska industrin inom processforskning och kvalitetskontroll av färdiga produkter, och det har nu blivit den föredragna detekteringsmetoden för varje biologiska tillverkare.
Information om Bluekit -produkter
Produktfunktioner
Snabbdetektering, stark specificitet, tillförlitlig prestanda, den lägsta detektionsgränsen kan nå "FG" -nivån.
Produktparametrar
- Detektionsintervall: 3,00 × 101 ~ 3,00 × 105FG/μL
- Kvantifieringsgräns ：00 × 101fg/μl
- Detektionsgräns ：00 FG/μL
- Precision: CV% ≤ 15%.
Vanliga upptäckter och försiktighetsåtgärder
1. Detta kit är endast för in vitro -forskningsanvändning, inte för klinisk diagnos.
2. Satsen måste användas inom giltighetsperioden.
3. Alla komponenter i satsen rekommenderas att smälts i en låg - temperaturmiljö och sedan användas.
4. Följ endast strikt instruktionerna från operationsmetoden, all användning av kit som stödjer reagens för att säkerställa bästa detekteringseffekt.
5. Var uppmärksam på de olika provtagningsstegen i rätt tid för att ersätta spetsen, för att undvika korsföroreningar, undvik att öppna locket länge.
6. De slutliga testresultaten kan påverkas avsevärt av effektiviteten hos reagensen, operatörens driftsmetoder och testmiljön.
Produktkonsultation
Telefon: +86 - 18013115357
E-post:info@hillgene.com
Inläggstid: 2024 - 01 - 11 10:31:30
