Potreba pre testovanie zvyškového DNA E.coli
V poliach, ako je bunková a génová terapia, sú vírusové plazmidy amplifikované a fermentované pomocou E. coli ako hostiteľa. Amplifikovaný plazmid musí podstúpiť E.Coli zvyškovú kontrolu DNA kvality DNA, aby sa mohol použiť na infikovanie 293 buniek a na zabalenie vírusu. Preto je detekcia zvyškovej DNA E.coli kritická.
Regulačné požiadavky a metódy testovania
Súčasné usmernenia WHO a USA FDA odporúčajú zvyškovú DNA v hotových produktoch, aby neboli väčšie ako 10 ng/agent, a USA FDA tiež uvádza, že zvyškové DNA v hostiteľských bunkách biologických látok by nemalo byť väčšie ako 100 pg/činidlo. Všeobecné princípy európskeho farmakopoeia uvádza, že limit zvyškových DNA v biologických produktoch by nemala byť vyššia ako 10 ng/dávka, ale zvyškový limit DNA pre niektoré konkrétne vakcíny je prísnejší, napr. Zvyšková DNA v inaktivovanej vakcíne proti hepatitíde A by nemala byť vyššia ako 100 pg/dóza, a to v prípade vakcínu proti He -s. PG/dávka. Vydanie čínskeho farmakopoeia v roku 2020, časť III, stanovuje, že zvyšok DNA v biologických prípravkoch produkovaných na bunkovej matrici by nemal prekročiť 100 pg/dávku a zvyšok DNA vo vakcínach produkovaných na bakteriálnej alebo hubovej matrici by nemal prekročiť 10 ng/dávku.
Okrem toho pre metódy exogénneho stanovenia zvyškov DNA poskytujú aj národné farmakopoeie odporúčania. Vydanie amerického Pharmacopoeia 2017 2017 Všeobecného ustanovenia USP40 - NF35 1130 opisuje tri metódy na stanovenie exogénnych zvyškov DNA, ktoré sú hybridizáciou DNA sondy, metódou prahovej hodnoty a kvantitatívnou metódou PCR v reálnom čase. Európska farmakopoeia navrhuje skutočný čas kvantitatívny PCR a imunoenzymatickú metódu, dve citlivé analytické metódy na kvantifikáciu zvyškovej DNA hostiteľských buniek. Čínska verzia troch všeobecných pravidiel Pharmacopoeia 2020 2020 tiež stanovuje, že metódy detekcie zvyškov hostiteľských buniek DNA sú hybridizácia sondy DNA, fluorescenčné farbenie a kvantitatívne PCR.
Medzi nimi má metóda QPCR extrémne vysokú citlivosť, sekvenčnú špecificitu a presnosť, ktorá môže poskytnúť spoľahlivý prostriedok detekcie pre biofarmaceutický priemysel v procese výskumu a kontrole kvality hotových výrobkov a teraz sa stala preferovanou detekčnou metódou pre každého výrobcu biologických látok.
Informácie o produktoch Bluekit
Vlastnosti produktu
Rýchla detekcia, silná špecifickosť, spoľahlivý výkon, najnižší detekčný limit môže dosiahnuť úroveň „FG“.
Parametre produktu
- Rozsah detekcie: 3,00 × 101 ~ 3,00 × 105fg/μl
- Limit kvantifikácie ：× 101fg/μl
- Detekčný limit ：00 fg/μl
- Presnosť: CV% ≤ 15%.
Bežné problémy s detekciou a preventívne opatrenia
1. Táto súprava je určená iba pre výskumné použitie in vitro, nie na klinickú diagnostiku.
2. Súprava sa musí použiť v období platnosti.
3. Všetky komponenty v súprave sa odporúčajú roztaviť v prostredí s nízkou teplotou a potom sa použiť.
4. Iba prísne dodržiavajú pokyny operačnej metódy, všetky použitie súpravy podporujúce reagenty na zabezpečenie najlepšieho detekčného efektu.
5. Venujte pozornosť rôznym krokom odberu vzoriek včas, aby ste nahradili špičku, aby ste zabránili kontaminácii krížov, vyhnite sa otváraniu veka na dlhú dobu.
6. Výsledky konečných testov môžu byť významne ovplyvnené účinnosťou reagencií, prevádzkovým metódam a testovacím prostredím.
Konzultácia
Telefón: +86 - 18013115357
E -mail:info@hillgene.com
Čas príspevku: 2024 - 01 - 11 10:31:30
