Pichia pastoris HCP(宿主細胞タンパク質)残留検出キット
Pichia pastoris HCP(宿主細胞タンパク質)残留検出キット
✓✓ Pichia pastoris -具体的-交差- CHO/HCPSとの反応性
✓✓ 準備ができている- -使用-サンプルの前処理は必要ありません
目的の使用
このキットは、から派生したバイオ医薬品の宿主細胞タンパク質(HCP)残基の定量的検出用に設計されています Pichia pastoris 株(GS115、x33など)、1 step酵素-リンクされた免疫吸着アッセイ(ELISA)を使用します。 研究のみのためにのみ。診断目的ではありません。
検出の原則
キットはaを使用します サンドイッチエリサ 方法:
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コーティング:マイクロプレートウェルは、ヒツジのポリクローナル抗体で処理されています Pichia pastoris HCPS。
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インキュベーション:サンプル/キャリブレーターが追加され、その後HRPが続きます-共役ヒツジポリクローナル抗-Pichia pastoris HCP抗体。
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検出:洗浄後、色の発達のためにTMB基板が追加されます。反応が停止し、吸光度が測定されます 450 nm.
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定量:HCP濃度は、標準曲線(吸光度∝HCP濃度)から計算されます。
重要な機能
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サンプルの前処理は必要ありません (希釈検証のみが必要です)。
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合理化されたプロトコル:最小ステップ、迅速な結果(2時間未満)。
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高い特異性と信頼性:最適化 Pichia pastoris HCPS。
技術ノート
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互換性のあるサンプル:細胞培養上清、精製生物学。
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ダイナミックレンジ:1〜100 ng/ml(典型)。
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規制の整合性:プロセス開発およびGMPロットリリーステストに適しています。
使用プロセス1。平衡化
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すべてのコンポーネントを室温(20分以上)に持ち込みます。
2。サンプル/抗体の添加-
サンプル/キャリブレーターを追加します:100 µl/well
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1x酵素-共役抗体を追加します:100 µl/well(凡例を参照)
3。インキュベーション-
RTでインキュベートし、光から保護され、600 rpmで3時間保護されています(凡例を参照)
4。洗濯-
洗浄1:300 µL/ウェル1xバッファー(垂直プレートの位置)
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2 - 5を洗浄します:300 µl/well 1xバッファー、5回の合計洗浄
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パットドライ:最後の洗浄後、吸収性紙の上にプレートを反転させます
5。TMB基板開発-
TMBを追加します:100 µl/well
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開発する:RTで10分(光から保護)
6.反応と読み取りを停止します-
停止ソリューションを追加します:50 µl/well
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立つ:5分
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読む:450 nmのOD(リファレンス620 nm)
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成分 | 製品番号 | 仕様 | 説明 |
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事前にコーティングされた抗-ピチアHCPマイクロプレート | PNA015 | 8ウェル×12ストリップ | 羊ポリクローナル抗-でコーティングされていますPichia pastoris HCP抗体。 Desicantでホイルポーチで密封されています。光から保護された保管。 |
ピチアHCPキャリブレーター | PNB015 | 2つのバイアル | 凍結乾燥粉末。 500μLのキャリブレーター希釈液(PNC002)を備えた再構成。溶解のために5〜10分かかります(解決策は明確です)。光から保護された保管。 |
キャリブレーター希釈液 | PNC002 | 1.5 ml×1チューブ | Pichia HCPキャリブレーターを再構成するための明確なソリューション。 |
アッセイ希釈剤 | PNE006 | 25 ml×2ボトル | キャリブレーター、サンプル、および酵素-共役抗体を希釈するため。新しいサンプルの最適希釈係数を検証します。 |
洗浄バッファー(10×濃縮物) | PNF001 | 25 ml×2ボトル | プレート洗浄用。結晶は低温で形成される可能性があります。これは、使用前に37°Cで溶解します。超純水で10倍希釈します。 |
HRP -共役抗-ピチアHCP抗体(100×) | PNN009 | 120μl×1チューブ | ヒツジポリクローナル抗体。使用前にアッセイ希釈液で100倍を希釈します。光から保護された保管。 |
TMB基板 | PND004 | 12 ml×1ボトル | 使用前に室温(20分以上)に平衡化します。光から保護された保管。 |
解決策を停止します | PNI002 | 6 ml×1ボトル | HCLが含まれています。ゴーグルを着用し、肌の接触を避けてください。 |
シーリングフィルム | PNK001 | 3枚 | 汚染と蒸発を防ぐために、マイクロプレートストリップを覆うため。 |
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