ضرورت آزمایش DNA باقیمانده E.Coli
در زمینه هایی مانند سلول و ژن درمانی ، پلاسمیدهای ویروسی با استفاده از E. coli به عنوان میزبان تقویت و تخمیر می شوند. پلاسمید تقویت شده قبل از استفاده از آن برای آلوده کردن 293 سلول و بسته بندی ویروس ، باید تحت کنترل کیفیت DNA باقیمانده E.Coli قرار بگیرد. بنابراین ، تشخیص DNA باقیمانده E.coli بسیار مهم است.
الزامات نظارتی و روشهای آزمایش
دستورالعمل های فعلی WHO و ایالات متحده ، DNA باقیمانده در محصولات نهایی را بیش از 10 نانوگرم/عامل توصیه می کند ، و FDA ایالات متحده همچنین اظهار داشت که DNA باقیمانده در سلولهای میزبان بیولوژیک نباید بیش از 100 pg/عامل باشد. اصول کلی فارماکوپه اروپایی تصریح می کند که محدودیت DNA باقیمانده در محصولات بیولوژیکی نباید بیش از 10 نانوگرم در دوز باشد ، اما حد DNA باقیمانده برای برخی از واکسن های خاص دقیق تر است ، به عنوان مثال ، DNA باقیمانده در واکسن غیرفعال در برابر هپاتیت A نباید بالاتر از HESPATITS در برابر HESCCITS نباشد که در برابر هپاتیت بالاتر از 100 pg/dose باشد ، و این در مورد این موارد در این موارد در برابر هپاتیت A بیشتر از 100 pg/dose نیست ، و این در مورد این موارد در برابر هپاتیت A بیشتر از 100 pg/dose نیست ، و در آن مواردی است PG/دوز. نسخه 2020 فارماکوپه چینی ، قسمت سوم ، تصریح می کند که باقیمانده DNA در آماده سازی های بیولوژیکی تولید شده بر روی ماتریس سلولی نباید از 100 pg/دوز تجاوز کند ، و باقی مانده DNA در واکسن های تولید شده بر روی ماتریس باکتریایی یا قارچی نباید از 10 نانوگرم/دوز تجاوز کند.
علاوه بر این ، برای روش های تعیین باقیمانده DNA اگزوژن ، داروسازی ملی نیز توصیه های راهنمایی را ارائه می دهد. نسخه Pharmacopoeia 2017 USP40 - NF35 General Presential 1130 سه روش برای تعیین باقیمانده های DNA اگزوژن ، که هیبریداسیون پروب DNA ، روش آستانه و روش PCR کمی واقعی هستند ، توصیف می کند. فارماکوپه اروپایی روش واقعی PCR و روش ایمونوآنزیماتیک ، دو روش تحلیلی حساس برای تعیین کمیت DNA باقیمانده سلول میزبان را ارائه می دهد. نسخه Pharmacopoeia 2020 از سه قانون کلی 3407 همچنین تصریح می کند که روش تشخیص DNA سلول میزبان ، هیبریداسیون پروب DNA ، رنگ آمیزی فلورسانس و PCR کمی است.
در میان آنها ، روش qPCR دارای حساسیت بسیار بالایی ، ویژگی و دقت توالی است که می تواند وسیله ای مطمئن برای تشخیص صنعت بیو دارویی در تحقیق فرآیند و کنترل کیفیت محصولات نهایی فراهم کند و اکنون به روش تشخیص ارجح برای هر تولید کننده بیولوژیک تبدیل شده است.
اطلاعات مربوط به محصولات Bluekit
ویژگی های محصول
تشخیص سریع ، ویژگی قوی ، عملکرد قابل اعتماد ، کمترین حد تشخیص می تواند به سطح "FG" برسد.
پارامترهای محصول
- دامنه تشخیص: 3.00 × 101 ~ 3.00 × 105fg/میکرولیتر
- حد کمیت00 00 101fg/میکرولیتر
- حد تشخیص00 fg/μll
- دقت: CV ٪ 15 ٪.
مشکلات تشخیص مشترک و اقدامات احتیاطی
1. این کیت فقط برای استفاده در شرایط آزمایشگاهی است ، نه برای تشخیص بالینی.
2. کیت باید در دوره اعتبار استفاده شود.
3. تمام اجزای موجود در کیت توصیه می شود در یک محیط دمای کم ذوب شود و سپس مورد استفاده قرار گیرد.
4. فقط با دستورالعمل روش عملکرد ، تمام استفاده از معرفهای پشتیبانی کیت برای اطمینان از بهترین اثر تشخیص مطابقت داشته باشید.
5. به مراحل نمونه گیری مختلف به موقع توجه کنید تا نوک را جایگزین کنید ، برای جلوگیری از آلودگی به صلیب ، از باز کردن درب برای مدت طولانی جلوگیری کنید.
6. نتایج آزمون نهایی می تواند به طور قابل توجهی تحت تأثیر اثربخشی معرفها ، روشهای عملیاتی اپراتور و محیط آزمون باشد.
مشاوره محصول
تلفن: +86 - 18013115357
ایمیل:info@hillgene.com
زمان پست: 2024 - 01 - 11 10:31:30
