Η αναγκαιότητα για δοκιμή υπολειμματικού ϋΝΑ E.Coli
Σε πεδία όπως η κυτταρική και η γονιδιακή θεραπεία, τα ιικά πλασμίδια ενισχύονται και ζυμώνονται χρησιμοποιώντας Ε. Coli ως ξενιστή. Το ενισχυμένο πλασμίδιο πρέπει να υποβληθεί σε υπολειμματικό έλεγχο ποιότητας DNA e.coli προτού να μπορεί να χρησιμοποιηθεί για να μολύνει 293 κύτταρα και να συσκευάσει τον ιό. Επομένως, η ανίχνευση του υπολειπόμενου DNA του E.coli είναι κρίσιμη.
Κανονιστικές απαιτήσεις και μεθόδους δοκιμών
Οι τρέχουσες κατευθυντήριες γραμμές του WHO και των ΗΠΑ FDA συνιστούν το υπολειπόμενο DNA στα τελικά προϊόντα να μην είναι μεγαλύτερα από 10 ng/παράγοντα και ο αμερικανικός FDA δηλώνει επίσης ότι το υπολειμματικό DNA σε κύτταρα ξενιστή των βιολογικών δεν πρέπει να είναι μεγαλύτερη από 100 pg/παράγοντας. Οι γενικές αρχές της ευρωπαϊκής φαρμακοποιίας ορίζουν ότι το όριο του υπολειπόμενου DNA σε βιολογικά προϊόντα δεν πρέπει να είναι μεγαλύτερο από 10 ng/δόση, αλλά το υπολειμματικό όριο DNA για ορισμένα συγκεκριμένα εμβόλια δεν πρέπει να είναι υψηλότερο από τα 10 pg/δόσης. pg/δόση. Η έκδοση του 2020 της κινεζικής φαρμακοποιίας, μέρος ΙΙΙ, ορίζει ότι το υπόλειμμα DNA σε βιολογικά παρασκευάσματα που παράγονται σε κυτταρική μήτρα δεν πρέπει να υπερβαίνει τα 100 pg/δόσης και το υπόλειμμα DNA σε εμβόλια που παράγονται σε βακτηριακή ή μυκητιακή μήτρα δεν πρέπει να υπερβαίνουν τα 10 ng/δόση.
Επιπλέον, για τις μεθόδους εξωγενούς προσδιορισμού των υπολειμμάτων DNA, οι εθνικές φαρμακοποιίες παρέχουν επίσης συστάσεις καθοδήγησης. Η έκδοση των ΗΠΑ Pharmacopoeia 2017 του USP40 - NF35 General Provision 1130 περιγράφει τρεις μεθόδους για τον προσδιορισμό των εξωγενών υπολειμμάτων DNA, τα οποία είναι υβριδισμός ανιχνευτή DNA, μέθοδος κατωφλίου και πραγματική - ποσοτική μέθοδος PCR χρόνου. Η ευρωπαϊκή φαρμακοποιία προτείνει πραγματική ποσοτική PCR και ανοσοενζυματική μέθοδο, δύο ευαίσθητες αναλυτικές μεθόδους για την ποσοτικοποίηση του υπολειμματικού DNA του κυττάρου του ξενιστή. Η κινεζική έκδοση Pharmacopoeia 2020 των τριών γενικών κανόνων 3407 ορίζει επίσης ότι οι μέθοδοι ανίχνευσης υπολειμμάτων DNA του DNA ξενιστή είναι υβριδοποίηση ανιχνευτή DNA, χρώση φθορισμού και ποσοτική PCR.
Μεταξύ αυτών, η μέθοδος qPCR έχει εξαιρετικά υψηλή ευαισθησία, εξειδίκευση αλληλουχίας και ακρίβεια, η οποία μπορεί να προσφέρει ένα αξιόπιστο μέσο ανίχνευσης για τη βιοφαρμακευτική βιομηχανία στην έρευνα διεργασιών και τον ποιοτικό έλεγχο των τελικών προϊόντων και έχει γίνει πλέον η προτιμώμενη μέθοδος ανίχνευσης για κάθε κατασκευαστές βιολογικών.
Πληροφορίες για τα προϊόντα BlueKit
Χαρακτηριστικά προϊόντος
Η ταχεία ανίχνευση, η ισχυρή εξειδίκευση, η αξιόπιστη απόδοση, το χαμηλότερο όριο ανίχνευσης μπορούν να φθάσουν στο επίπεδο "FG".
Παραμέτρους προϊόντος
- Εύρος ανίχνευσης: 3,00 × 101 ~ 3,00 × 105fg/μL
- Όριο ποσοτικοποίησης:00 × 101fg/μL
- Όριο ανίχνευσης:00 FG/μL
- Ακρίβεια: CV% ≤ 15%.
Κοινά προβλήματα και προφυλάξεις ανίχνευσης
1. Αυτό το κιτ είναι μόνο για χρήση από in vitro ερευνητική χρήση, όχι για κλινική διάγνωση.
2. Το κιτ πρέπει να χρησιμοποιηθεί εντός της περιόδου εγκυρότητας.
3. Όλα τα εξαρτήματα του κιτ συνιστώνται να λιώσουν σε περιβάλλον χαμηλής θερμοκρασίας και στη συνέχεια να χρησιμοποιούνται.
4. Μόνο συμμορφώνεται αυστηρά με τις οδηγίες της μεθόδου λειτουργίας, όλη τη χρήση του κιτ που υποστηρίζουν τα αντιδραστήρια για να εξασφαλιστεί το καλύτερο αποτέλεσμα ανίχνευσης.
5. Δώστε προσοχή στα διάφορα βήματα δειγματοληψίας εγκαίρως για να αντικαταστήσετε την άκρη, για να αποφύγετε τη μόλυνση σταυροειδούς, αποφύγετε το άνοιγμα του καπάκι για μεγάλο χρονικό διάστημα.
6. Τα τελικά αποτελέσματα των δοκιμών μπορούν να επηρεαστούν σημαντικά από την αποτελεσματικότητα των αντιδραστηρίων, τις μεθόδους λειτουργίας του χειριστή και το περιβάλλον δοκιμής.
Διαβούλευση προϊόντων
Τηλέφωνο: +86 - 18013115357
E-mail:info@hillgene.com
Χρόνος δημοσίευσης: 2024 - 01 - 11 10:31:30
