Nødvendigheden af E.Coli -resterende DNA -test
I felter som celle- og genterapi forstærkes og gæres virale plasmider ved hjælp af E. coli som vært. Det amplificerede plasmid skal gennemgå E.Coli -resterende DNA -kvalitetskontrol, før det kan bruges til at inficere 293 celler og pakke virussen. Derfor er påvisning af E.Coli -resterende DNA kritisk.
Lovgivningsmæssige krav og testmetoder
Nuværende WHO og US FDA -retningslinjer anbefaler, at resterende DNA i færdige produkter ikke er større end 10 ng/agent, og den amerikanske FDA siger også, at resterende DNA i værtsceller i biologik ikke skal være større end 100 pg/middel. De generelle principper for den europæiske farmakopoeia bestemmer, at grænsen for resterende DNA i biologiske produkter ikke bør være større end 10 ng/dosis, men den resterende DNA -grænse for nogle særlige vacciner er strengere, for eksempel, og resterende DNA i den inaktiverede vaccine mod hepatitis A bør ikke være højere end 100 PG/dosis, og at den i den vaccine mod hepitis skal være højere end 10 PG PG/dosis. 2020 -udgaven af den kinesiske farmakopé, del III, bestemmer, at DNA -resterne i biologiske præparater, der er produceret på en cellulær matrix, ikke bør overstige 100 pg/dosis, og DNA -remanensen i vacciner produceret på en bakteriel eller svampe -matrix bør ikke overstige 10 ng/dosis.
For metoderne til eksogen DNA -restbestemmelse giver nationale farmakopøeias også vejledningsanbefalinger. U.S. Pharmacopoeia 2017 -udgaven af USP40 - NF35 Generel bestemmelse 1130 beskriver tre metoder til bestemmelse af eksogene DNA -rester, som er DNA -sondehybridisering, tærskelmetode og reel - tid kvantitativ PCR -metode. Den europæiske farmakopoeia foreslår reel - tidskvantitativ PCR og immunoenzymatisk metode, to følsomme analysemetoder til kvantificering af værtscellestresterende DNA. Den kinesiske farmakopoeia 2020 -version af de tre generelle regler 3407 bestemmer også, at værtscelle -DNA -restdetektionsmetoder er DNA -sondehybridisering, fluorescensfarvning og kvantitativ PCR.
Blandt dem har QPCR -metoden ekstremt høj følsomhed, sekvensspecificitet og nøjagtighed, som kan give et pålideligt middel til detektion for den biofarmaceutiske industri i procesundersøgelser og kvalitetskontrol af færdige produkter, og det er nu blevet den foretrukne detektionsmetode for hver biologisk producenter.
Oplysninger om BlueKit -produkter
Produktfunktioner
Hurtig detektion, stærk specificitet, pålidelig ydelse, den laveste detektionsgrænse kan nå “FG” -niveauet.
Produktparametre
- Detektionsområde: 3,00 × 101 ~ 3,00 × 105FG/μl
- Kvantificeringsgrænse ：00 × 101fg/μl
- Detektionsgrænse ：00 FG/μL
- Præcision: CV% ≤ 15%.
Almindelige detektionsproblemer og forholdsregler
1. Dette sæt er kun til in vitro -forskningsbrug, ikke til klinisk diagnose.
2. Sættet skal bruges inden for gyldighedsperioden.
3. alle komponenter i kittet anbefales at blive smeltet i et lavt - temperaturmiljø og derefter brugt.
4. overhold kun strengt instruktionerne i driftsmetoden, al brug af kittet understøttende reagenser for at sikre den bedste detektionseffekt.
5. Vær opmærksom på de forskellige prøveudtagningstrin på en rettidig måde for at udskifte spidsen, for at undgå kryds - forurening, undgå at åbne låget i lang tid.
6. De endelige testresultater kan påvirkes markant af effektiviteten af reagenserne, operatørens driftsmetoder og testmiljøet.
Produktkonsultation
Telefon: +86 - 18013115357
E -mail:info@hillgene.com
Posttid: 2024 - 01 - 11 10:31:30
