Nutnost pro zbytkové testování DNA E.coli
V polích, jako je buněčná a genová terapie, jsou virové plazmidy amplifikovány a fermentovány pomocí E. coli jako hostitele. Amplifikovaný plazmid musí podstoupit kontrolu kvality DNA E.coli, než bude možné použít k infekci 293 buněk a zabalení viru. Detekce zbytkové DNA E.coli je proto kritická.
Regulační požadavky a metody testování
Současné pokyny FDA WHO a USA doporučují zbytkovou DNA v hotových produktech, aby nebyly větší než 10 ng/agentury a americká FDA také uvádí, že zbytková DNA v hostitelských buňkách biologických buněk by neměla být větší než 100 pg/činidla. Obecné principy evropské farmakopoeia stanoví, že limit zbytkové DNA v biologických produktech by neměl být větší než 10 ng/dávka, ale zbytková DNA limit pro některé konkrétní vakcíny je přísnější, např. Zbytková DNA v inaktivované vakcíně proti hepatitidě A by neměla být vyšší než 10 PG a v tom, že by neměla být vyšší než 10, by neměla být vyšší než 10, než by byla vakcitinu, než 10, než by měla být vyšší než 10, než by byla vakcitinu, která by měla být vyšší než 10 PG/DOSINE, a to, že by měla být vyšší než 100 PG/dose, která by měla být vyšší než 100 Pg/dose, která by měla být vyšší než 100 PG/dose, která by měla být vyšší než 100 Pg/dose. PG/dávka. Vydání čínské farmakopoeia z roku 2020, část III, stanoví, že zbytky DNA v biologických přípravcích produkovaných na buněčné matrici by neměly překročit 100 pg/dávky a zbytky DNA ve vakcínách produkované na bakteriální nebo plísňové matrici by neměly překročit 10 ng/dávky.
Kromě toho, pro metody stanovení exogenního zbytku DNA poskytují národní lékárny také doporučení. Americké farmakopoeia 2017 vydání USP40 - NF35 Obecné ustanovení 1130 popisuje tři metody pro stanovení exogenních zbytků DNA, což jsou hybridizace sondy DNA, prahová metoda a skutečná - časově kvantitativní PCR metoda. Evropská farmakopoeia navrhuje skutečnou - časově kvantitativní PCR a imunoenzymatickou metodu, dvě citlivé analytické metody pro kvantifikaci zbytkové DNA hostitelských buněk. Čínská verze Pharmacopoeia 2020 tří obecných pravidel 3407 také stanoví, že metodami detekce zbytků DNA hostitelských buněk jsou hybridizace sondy DNA sondy DNA, fluorescenční barvení a kvantitativní PCR.
Mezi nimi má metoda QPCR extrémně vysokou citlivosti, sekvenční specificitu a přesnost, která může poskytnout spolehlivý prostředek detekce pro biofarmaceutický průmysl při výzkumu procesu a kontrole kvality hotových produktů a nyní se stala preferovanou metodou detekce pro každý výrobce biologiky.
Informace o produktech Bluekit
Funkce produktu
Rychlá detekce, silná specificita, spolehlivý výkon, nejnižší detekční limit mohou dosáhnout úrovně „FG“.
Parametry produktu
- Rozsah detekce: 3,00 × 101 ~ 3,00 × 105fg/μl
- Limit kvantifikace ：00 × 101FG/μl
- Limit detekce ：00 FG/μl
- Přesnost: CV% ≤ 15%.
Běžné problémy detekce a preventivní opatření
1. Tato sada je určena pouze pro výzkum in vitro, nikoli pro klinickou diagnózu.
2. souprava musí být použita v období platnosti.
3. Všechny komponenty v soupravě se doporučují roztavit se v prostředí nízkého teploty a poté použity.
4.. Pouze přísně dodržujte pokyny metody operace, veškeré použití soupravy podporujících činidla k zajištění nejlepšího detekčního efektu.
5. Věnujte pozornost různým krokům odběru vzorků včas, abyste nahradili špičku, aby se zabránilo kontaminaci křížení, vyhněte se otevírání víka po dlouhou dobu.
6. Výsledky konečného testu mohou být významně ovlivněny účinností činidel, provozními metodami operátora a testovacím prostředím.
Konzultace s produktem
Telefon: +86 - 18013115357
E-mail:info@hillgene.com
Čas příspěvku: 2024 - 01 - 11 10:31:30
