Необходимостта от остатъчно ДНК тестване на E.coli
В полета като клетъчна и генна терапия вирусните плазмиди се амплифицират и ферментират с помощта на E. coli като гостоприемник. Амплифицираният плазмид трябва да претърпи E.coli остатъчен контрол на качеството на ДНК, преди да може да се използва за заразяване с 293 клетки и пакетиране на вируса. Следователно, откриването на остатъчната ДНК на E.coli е от решаващо значение.
Регулаторни изисквания и методи за тестване
Настоящите указания на СЗО и САЩ FDA препоръчват остатъчната ДНК в готовите продукти да бъде не по -голяма от 10 ng/агент, а US FDA също така заявява, че остатъчната ДНК в клетките на гостоприемниците на биологичните данни трябва да бъде не по -голяма от 100 pg/агент. The General Principles of the European Pharmacopoeia stipulates that the limit of residual DNA in biological products should not be greater than 10 ng/dose, but the residual DNA limit for some particular vaccines is more stringent, e.g., the residual DNA in the inactivated vaccine against hepatitis A should not be higher than 100 pg/dose, and that in the vaccine against hepatitis B should not be higher than 10 PG/доза. Изданието от 2020 г. на китайската фармакопея, част III, предвижда, че остатъкът от ДНК в биологични препарати, произведени върху клетъчна матрица, не трябва да надвишава 100 pg/доза, а ДНК остатъкът във ваксини, получени върху бактериална или гъбична матрица, не трябва да надвишава 10 ng/доза.
В допълнение, за методите за определяне на екзогенни ДНК остатъци, националните фармакопеи също дават препоръки за насоки. Изданието на американската фармакопея 2017 на USP40 - NF35 Обща разпоредба 1130 описва три метода за определяне на екзогенни ДНК остатъци, които са хибридизация на ДНК сондата, метод на праг и реален - Количествен PCR метод на време. Европейската фармакопея предлага реална - Количествен PCR и имуноензиматичен метод на времето, два чувствителни аналитични метода за количествено определяне на остатъчната ДНК на клетките на гостоприемника. Китайската фармакопея 2020 версия на трите общи правила 3407 също така предвижда, че методите за откриване на остатъци от ДНК на гостоприемника са хибридизация на ДНК сондата, оцветяване на флуоресценция и количествен PCR.
Сред тях методът на QPCR има изключително висока чувствителност, специфичност на последователността и точност, които могат да осигурят надеждно средство за откриване на биофармацевтичната индустрия при изследване на процесите и контрол на качеството на готовите продукти и сега се превърна в предпочитания метод за откриване на всеки производител на биологични средства.
Информация за продуктите на Bluekit
Характеристики на продукта
Бързото откриване, силната специфичност, надеждната ефективност, най -ниската граница на откриване могат да достигнат нивото на „FG“.
Параметри на продукта
- Диапазон на откриване: 3.00 × 101 ~ 3.00 × 105fg/μl
- Ограничение на количественото определяне:00 × 101fg/μl
- Ограничение за откриване:00 fg/μl
- Прецизност: CV% ≤ 15%.
Често срещани проблеми с откриването и предпазни мерки
1. Този комплект е само за изследване на in vitro, а не за клинична диагноза.
2. Комплектът трябва да се използва в рамките на периода на валидност.
3. Всички компоненти в комплекта се препоръчват да бъдат разтопени в ниска - температурна среда и след това да се използват.
4. Само строго спазвайте инструкциите на метода на работа, цялото използване на комплекта, поддържащи реагенти, за да се гарантира най -добрият ефект на откриване.
5. Обърнете внимание на различните стъпки за вземане на проби навреме, за да замените върха, за да избегнете кръстосано замърсяване, избягвайте отварянето на капака за дълго време.
6. Крайните резултати от теста могат да бъдат повлияни значително от ефективността на реагентите, оперативните методи на оператора и тестовата среда.
Консултация с продукти
Телефон: +86 - 18013115357
Имейл:info@hillgene.com
Време за публикация: 2024 - 01 - 11 10:31:30
