Isolating DNA mai le E. Coli o se tulaga taua i le Molecular Biology. O lenei tusitusiga e te o aʻe ai i le faʻasologa atoa, e faʻaalia ai auiliiliga auiliili ma faʻamatalaga, mautinoa lou malamalama uma i ai le saienisi ma le faʻataʻitaʻiga o taualumaga. Pe o oe o se tagata suʻesuʻe poʻo se tagata fou i le Lab, o lenei taʻiala o se mea taua ua taua.
Sauniuniga o sela fofo
● aoina o le E. Coli sela
O le sitepu muamua i le Isolating Dna mai le E. Coli e aofia ai le aoina o le Bacterrial sela. E masani ona manaʻomia le faʻateleina o le E. Coli i se vai talafeagai seia oʻo ina maua le Loginsithmity tuputupu ae vaega. O le taimi e taua tele ona o sela i lenei vaega e sili ona aoga ma faigofie le lyse, lea o le a tumau i le dna ore.
● O sela toe tusia i se pamu talafeagai
Aoina sela o loʻo toe faʻailoa mai i se pale talafeagai. O se filifiliga masani o se tris - Edta (te) buffer, lea e fesoasoani e faʻatumauina le faʻamaoni o le DNA i le taimi o le le faʻasoaina atu. O le Buffer Auauna tele faamoemoega: E faʻamalosia ai le ph, ma clattings eseʻese ata lea e ono faʻaalia ai se degrade dam, ma maua ai se sili ona lelei ionacm formonic.
Centrifugating i sela ballet
● Faʻavae mo le Centrifugetation (saoasaoa ma le taimi)
A maeʻa ona toe tusia le sela, o le faʻamalologa o loʻo aʻafia i le centrifaguation i le palu o sela. Centrifugation Speed ma taimi o le taua taua. E masani lava, o le centrifugation o loʻo faia i le 4,000 - 6,000 g mo le 10 - 15 minute i le 4 ° C. O lenei faamautinoaga e faia e le sela sela se pallet i le pito i lalo o le unarrifoge faagaau.
● Taua taua o le fetaui lelei
E taua le eleelea lelei e tuuesea sela mai le tuputupu ae o le tuputupu ae ma isi vaega. A 'aina lelei - Auina Pallet o loʻo faia mulimuli laasaga faigofie ma sili atu le lelei, faʻamautinoaina le faʻaititia o le leiloa o sela ma le mea lea, o le mea sili ona lelei DNA faʻafouina.
Aveesea o le sili ona lelei
● metotia mo le sili atu le aveeseina
O le taimi lava e faʻaaogaina ai sela, o le sili atu (le suavai i luga o le pellet) e tatau ona aveʻesea ma le faʻaeteete e aunoa ma le faʻalavelaveina o le sela pallet. E masani ona faia lea e faʻaaoga ai se micropepette. E taua tele le faia o lenei laasaga ma le le fiafia e aloese ai mai le leiloa o sela.
● Faalagolagoina le faʻaititia o le leiloa o le sela pallet
Faʻamautinoaina o le leiloa leiloa o le sela pulu e aofia ai le pipili faʻaeteete ma, pe a manaʻomia, tele taamilosaga o le centrifugation ma le sili ona aveeseina. O le sini o le taofia o le tele o sela e mafai ai i le pulu mo le maualuga dna toe faaleleia.
Faaopoopoga o le nutimomoy
● vaega o le nuckiy hysis tali
O le RICICIy Hysins Fofoga E masani ona aofia ai se mea leaga (pei o SDS), o se buffer (pei o le truis - hcl) O le mea e faʻaleagaina ai le sela membrane ma le teutusi i le au teutusi, e taofi ai le kuka feaveaʻi, aofia ai ma le DNA, i le fofo.
● Faatinoina i le gagau i lalo o puipui puipui
O le tali a le Cnicoi Lyiss e le naʻo le gatete i le sela o le sela ae na te le maua foi le Porotini ma Lipids, o le talepeina lelei o le DNA i le fofo.
Toefaatasi o sela
● agamalu paipa e aloese ai mai le dna
O le taimi lava e faʻaopoopo ai le suʻega o le uluaʻi tali, o sela e tatau ona toe faʻafouina lemu e aloese ai mai le DNA o le DNA. O le matamuli e mafai ona gagau le DNA i ni mea laiti, o le mea lea e mafai ona avea ma faʻafitauli mo le maualalo o talosaga e manaʻomia le maualuga - Molecular - Molem DNA.
● Faamautinoaina atoatoa toese
Faʻamaeʻa le toe faʻaleleia o le mautinoa o sela uma o sela o loʻo i ai ma le amioletonu, faʻateleina le toe faaleleia o le dna. O lenei mafai ona ausia e le agamalu paipa poʻo le vorteexing le vaifofo i le saoasaoa tele.
Insubrates e lyse sela
● Faʻatoa tulaga mo le faʻalavelave
O sela ressoped e i ai i se vevela faʻapitoa ina ia mautinoa atoatoa ai le lysisi. E masani ona faia lea i le 37 ° C i le 55 ° C i. O le vevela tonu ma le umi e mafai ona fesuisuiai faʻalagolago i le protocol ma faʻapitoa manaʻoga o le DNA Utilation Kit o loʻo faʻaaogaina.
● O le umi e manaʻomia mo le lelei le soʻoga
O le masani o le umi o le inisi le i le va o le 20 i le 30 minute, ae e mafai ona fetuʻunaʻi e faʻavae i le lelei o le cysis o le lyssis. O le umi o le aoga e ono manaʻomia mo le soʻotaga ae e tatau ona paleni i le lamatia o le DNA Degraddation.
Malulu i le potu vevela
● Taua le Manumalo Leaga
Ina ua maeʻa le Invebation, o le sossate e faʻasolosolo malie lava i potu vevela. Fesoasoani faʻamafanafana fesoasoani i le faʻamalosia o le DNA ma faʻaititia le tulaga lamatia o le vevela o le vevela o le vevela, lea e ono faʻaleagaina ai le DNA.
● Aafiaga i le DNA ma Cellur Rallris
O le malu o le potu malolo faʻatagaina le telefoni feaveaʻi e faʻaosofia ai, faʻafaigofie ai ona vavaeʻese le dna i ni sitepu mulimuli ane. O lenei mea e fesoasoani e faʻamautu ai gaioiga enzyme ma faʻafaigofie le aveeseina o rna e Ranse togafitiga.
Faaopopoga o Rnase fofo
● Faamoemoega o Rnase i le taualumaga
O le tali a Rnase ua faʻaopopo ia Degrade Rna, lea e ono mafai foi ona faʻataʻotoina - Faʻamamaina ma le DNA ma faʻalavelave ai i lalo o talosaga. Rnase filifiliga filifilia rna, tuua le dna malosi.
● Puipuia RNA 'ailaina
Faʻamaloloina RNA o loʻo afaina ai e taua tele mo talosaga e manaʻomia le saʻo o le DNA, pei o le PCR ma le faʻasologa. O Tronase Togafiti e Mautinoa e leai se totogi o le DNA mai le RNA e oona.
Faamamaina o DNA
● Ai metotia mo le vavaeeseina DNA mai isi vaega telefoni
E tele metotia e mafai ona faʻaoga e faʻamamaina ai le DNA mai le lysate. E aofia ai le Phnol - Chlorofort Extractages, Ethanol timuga, ma faʻaaogaina pisinisi e. Coli DN Sna KND. E tofu lava le avanoa ma manaʻoga, ma pusa pisinisi e ofoina mai le faigofie ma ia faʻaiuga.
● Manatu mo DNA Manino
O le mama o se mea taua o mea taua mo le manuia o le maualalo o lalo talosaga. Faletupe pusa, pei o le felauaiga o le SAICPAY E. Coli Dva DEO PON, Mama o le Dona e ala i isi tagata leaga.
Teuina ma le taulimaina o le dasover dna
● sili ona lelei mo le teuina o DNA
Tasi le faʻamamaina, o le DNA e tatau ona teuina i se pale talafeagai, pei o le boffer, i - 20 ° c poʻo - 80 ° C Aloese mai le tele o le Freeze - Twow Cycles pei ona mafai ona mafua ai Dna Dna Degradation.
● Tausia le DNA amio saʻo mo faʻamatalaga i lalo
Ia tausisi le faamaoni o le dna, faʻaaoga le mea lilo, nucmole, leai se maua fua ma fofo. O lenei mea e mafua ai le le faʻaaogaina ma le talafeagai le tulafono ma talafeagai mo talosaga e pei o le faʻamutaina, seonae, ma le PCR.
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Taimi taimi: 2024 - 09 - 05 14:47:0:03
