ඊ. කෝපි වෙතින් ඩීඑන්ඒ හුදකලා කිරීම අණුක ජීව විද්යාවේ මූලික ක්රියා පටිපාටියකි. මෙම ලිපිය සමස්ත ක්රියාවලිය හරහා ඔබව ගමන් කරනු ඇති අතර සවිස්තරාත්මක පියවර සහ පැහැදිලි කිරීම් සපයන අතර එය ක්රියා පටිපාටියේ විද්යාව හා ප්රායෝගික අංශ ඔබ තේරුම් ගෙන ඇති බවට සහතික කරයි. ඔබ පළපුරුදු පර්යේෂකයෙකු හෝ විද්යාගාරයට නවකයෙකු වේවා, මෙම මාර්ගෝපදේශය වටිනා සම්පතක් වනු ඇත.
සෛල අත්හිටුවීම සකස් කිරීම
El කෝලි සෛල එකතු කිරීම
ඊ. කෝපි වලින් ඩීඑන්ඒ හුදකලා කිරීමේ පළමු පියවර වන්නේ බැක්ටීරියා සෛල එකතු කිරීමයි. මේ සඳහා සාමාන්යයෙන් මූල්යමය වර්ධන අවධිය කරා ළඟා වන තෙක් සුදුසු ද්රව මාධ්යයක ඊ. කෝලි වැඩිවීමට අවශ්ය වේ. මෙම අවධියේ ඇති සෛල වඩාත් ශක්ය වන අතර ගිනි වූ සෛල වඩාත් අඩු ඩීඑන්ඒ අස්වැන්නක් ලබා ගැනීමට පහසු නිසා කාලය තීරණ තීරණ තීරණාත්මක ය.
Appositional සුදුසු බෆරයක සෛල නැවත සකස් කිරීම
එකතු කරන ලද සෛල පසුව සුදුසු බෆරයක නැවත ලබා ගනී. පොදු තේරීමක් යනු උපුටා දැක්වීමේ ක්රියාවලියේදී ඩීඑන්ඒ හි අඛණ්ඩතාව පවත්වා ගැනීමට උපකාරී වන TRIT (TE) බෆරයකි. බෆරය බෆරය බහු අරමුණු ඉටු කරයි: එය ඩීඑන්ඒ පහත් කොට සලකන PH, චෙලේට් කලිසම් කැටායන ස්ථාවර වන අතර පසුව එන්සයිම ප්රතික්රියා සඳහා ප්රශස්ත අයනික් පරිසරයක් සපයයි.
පෙති සෛල වෙත කේන්ද්රීයකරණය
● කේන්ද්රාපසාරීකරණය සඳහා පරාමිතීන් (වේගය සහ වේලාව)
සෛල නැවත පණ ගැන්වීමෙන් පසු, අත්හිටුවීම සෛල පෙති ඇලවීම සඳහා කේන්ද්රාපසාරීකරණයට ලක් වේ. කේන්ද්රීයකරණ වේගය සහ වේලාව විවේචනාත්මක පරාමිතීන් වේ. සාමාන්යයෙන් කේන්ද්රාපසාරණය 4,000 ක් පමණ සිදු කරනු ලැබේ - 10,000 g සඳහා 10,000 ක් - විනාඩි 15 ක් - 4 ° C. සෛල සෛල කේන්ද්රාපසාරී නලයේ පතුලේ තද පෙත්තක් සාදයි.
Per නිසි පෙල් කලේපින්ගේ වැදගත්කම
සෛල වර්ධන මාධ්යයෙන් හා අනෙකුත් ද්රාව්ය සංරචක වලින් වෙන් කිරීම සඳහා නිසි පෙල්කය අත්යවශ්ය වේ. ළිඳක් - සෑදී ඇති පෙති පසුකාලීන පියවරයන් පහසු සහ වඩා කාර්යක්ෂම කරයි, එබැවින් අවම සෛල නැතිවීම සහතික කරයි, එබැවින් උපරිම ඩීඑන්ඒ අස්වැන්න.
අතිධ්යන ඉවත් කිරීම
Ands අබ්මිටානැට් ඉවත් කිරීම සඳහා ශිල්පක්රම
සෛල පෙලගැසී ගිය පසු, සෛල පෙති වලට බාධා නොකර අතිශයින්ම (පෙති වලට ඉහළින් ඇති ද්රව) පරිස්සමින් ඉවත් කළ යුතුය. මෙය සාමාන්යයෙන් සිදු කරනු ලබන්නේ මයික්රොපිපට්ටුවක් භාවිතා කරමිනි. ඕනෑම සෛලයක් අහිමි වීමෙන් වැළකී සිටීම සඳහා සූක්ෂම ලෙස මෙම පියවර ගැනීම ඉතා වැදගත්ය.
Pelior අවම සෛල පෙති අවම කිරීම සහතික කිරීම
සෛල පෙති අවම අලාභයක් සහතික කිරීම ප්රවේශමෙන් පිසට් කිරීම සහ අවශ්ය නම් කේන්ද්රාපසාත්මක වට කිහිපයක් සහ සුපිරි වාර්ෂික ඉවත් කිරීම. ඉලක්කය වන්නේ උපරිම ඩීඑන්ඒ ප්රකෘතිමත් වීම සඳහා පෙති වලින් හැකි තරම් සෛල හැකිතාක් සෛල තබා ගැනීමයි.
න්යෂ්ටීන් ලයිසිස් ද්රාවණයට අමතරව
Qu න්යෂ්ටි ලයිසිස් ද්රාවණවල සංරචක
න්යෂ්ටීන් ලයිසිස් ද්රාවණයේ සාමාන්යයෙන් සාමාන්යයෙන් ඩිටර්ජන්ට් (එස්ඩීඑස් වැනි) අඩංගු වේ, බෆරයක් (TRIS - HCL) සහ චෙලේටැවුම් නියෝජිතයෙකු (ඊඩීටීඒ වැනි). සෛල පටල සහ න්යෂ්ටික ලියුම් කවරයට ඩිටර්ජන්ට් බාධා කිරීම, ඩීඑන්ඒ ඇතුළු සෛලීය අන්තර්ගතය, විසඳුමට මුදා හැරීම.
Chines සෛල බිත්ති කඩා දැමීමේ කාර්යභාරය
න්යෂ්ටීන් ලයිසිස් ද්රාවණය සෛල පටලය පදවල පමණක් නොව ප්රෝටීන සහ ලිපිඩ ප්රතික්ෂේප කිරීම පමණක් නොව, සෛල බිත්ති සහ න්යෂ්ටික ලියුම් කවර, ඩීඑන්ඒ ද්රාවණයට මුදා හැරීම සඳහා.
සෛල නැවත පණ ගැන්වීම
Dna ඩී.එන්.ඒ.
න්යෂ්ටීන් ලයිසිස් ද්රාවණය වූ පසු, ඩීඑන්ඒ රැවුල කපන ලෙස සෛල මෘදු ලෙස නැවත ලබා ගත යුතුය. රැවුල කපමින් ඩීඑන්ඒ කුඩා කොටස් වලට කැඩී යා හැකිය, එය ඉහළ - අණුක - බර ඩී.එන්.ඒ.
Resport සම්පූර්ණ නැවත සකස් කිරීම සහතික කිරීම
සම්පූර්ණ ප්රතිචාර දැක්වීම මඟින් සියලුම සෛල ඒකාකාරව කර ඇති බව සහතික කරයි, ඩීඑන්ඒ ප්රතිසාධනය උපරිම කිරීම. මෙය මෘදු පයිප්ට් කිරීමෙන් හෝ අඩු වේගයකින් විසඳුම සුළි සුළඟකින් ලබා ගත හැකිය.
ලිස් සෛල වලට පුර්ව ලියාපදිංචි තක්සේරු කිරීම
පුර්ව ලියාපදිංචි තක්සේරු කිරීම සඳහා උෂ්ණත්ව සැකසුම්
නැවත සකස් කරන ලද සෛල සම්පූර්ණ ලිස්සිස් සහතික කිරීම සඳහා නිශ්චිත උෂ්ණත්වයකදී පුර්ව ලියාපදිංචි තක්සේරු කරනු ලැබේ. මෙය සාමාන්යයෙන් 37 ° C සිට 55 ° C දක්වා සිදු කෙරේ. ප්රොටෝකෝලය මත පදනම්ව නිශ්චිත උෂ්ණත්වය හා කාලසීමාව වෙනස් විය හැකිය, ඩීඑන්ඒ හුදකලා කට්ටලයේ භාවිතා කිරීමේ නිශ්චිත අවශ්යතා භාවිතා වේ.
Life ලදායී ලයිසිස් සඳහා අවශ්ය කාලය අවශ්ය වේ
පුර්ව ලියාපදිංචි තක්සේරුකරණය සඳහා සාමාන්ය කාලසීමාව මිනිත්තු 20 ත් 30 ත් අතර වේ, නමුත් එය සකස් කළ හැක්කේ සෛලවල ලිස්සිස් වල කාර්යක්ෂමතාව මත පදනම්ව සකස් කළ හැකිය. සම්පුර්ණ ලයිසිස් සඳහා දීර් පුර්ව ලියාපදිංචි කිරීම අවශ්ය විය හැකි නමුත් ඩීඑන්ඒ හායනය අවදානමට එරෙහිව සමබර විය යුතුය.
කාමර උෂ්ණත්වයට සිසිලනය
The ක්රමයෙන් සිසිලියේ වැදගත්කම
පුර්ව ලියාපදිංචි තක්සේරු කිරීමෙන් පසු ලයිස්ට් ක්රමයෙන් කාමර උෂ්ණත්වයට සිසිල් වේ. ක්රමලල සිසිලනය ඩීඑන්ඒ ස්ථාවර කිරීමට උපකාරී වන අතර තාප කම්පනය ඇතිවීමේ අවදානම අවම කරයි, එමඟින් ඩීඑන්ඒ පිරිහීමට ලක්විය හැකිය.
DNA සහ සෙලියුලර් සුන්බුන් වලට බලපෑම්
කාමර උෂ්ණත්වයට සිසිලනය සෛලීය සුන්බුන් වේගවත් කිරීමට ඉඩ සලසයි. මෙය එන්සයිම ක්රියාකාරකම් ස්ථාවර කිරීමට සහ ආර්එන්ඒසී ප්රතිකාර මගින් ආර්එන්ඒ ඉවත් කිරීමට පහසුකම් සපයයි.
RNASE විසඳුම එකතු කිරීම
Trist ක්රියා පටිපාටියේ RNASE හි අරමුණ
ආර්එන්ඒ පිරිහීමට රයිස් විසඳුම එකතු කරන අතර, එමඟින් ඩීඑන්ඒ සමඟ සම්බන්ධතාවයක් ඇති කළ හැකි අතර පහළම යෙදුම් වලට බාධා ඇති කරයි. රයිස් තෝරා බේරා ඩිජිටල්ස් ඩිං, ඩීඑන්ඒ නොවෙනස්ව තබා ඇත.
Rna Rna දූෂණය වැළැක්වීම
PCR සහ අනුක්රමය වැනි පිරිසිදු ඩීඑන්ඒ අවශ්ය යෙදුම් සඳහා RNA අපවිත්ර වීම ඉතා වැදගත්ය. Rnase ප්රතිකාරය හුදකලා ඩීඑන්ඒ විසින් ඊඑම්ඒ දූෂිතයන්ගෙන් තොරය ඇති බව සහතික කරයි.
ඩීඑන්ඒ පිරිසිදු කිරීම
Pla වෙනත් සෛලීය සංරචක වලින් ඩීඑන්ඒ වෙන් කිරීමේ ක්රම
LISATE වෙතින් ඩීඑන්ඒ පිරිසිදු කිරීම සඳහා ක්රම කිහිපයක් භාවිතා කළ හැකිය. මේවාට ෆිනෝල් - ක්ලෝරෝෆෝම් නිස්සාරණය, එතනෝල් වර්ෂාපතනය සහ වාණිජ ඊ.කෝලි ඩීඑන්ඒ කට්ටල භාවිතා කිරීම. සෑම ක්රමයකටම එහි වාසි සහ අවාසි ඇති අතර වාණිජමය කට්ටල පහසුව සහ ස්ථාවර ප්රති .ල ලබා දෙයි.
Dna ඩීඑන්ඒ පාරිශුද්ධභාවය පිළිබඳ සලකා බැලීම්
පූර්වභාවය පහත සඳහන් යෙදුම්වල සාර්ථකත්වයට තීරණාත්මක සාධකයකි. සෛල චිකිත්සාව ඊ. කෝලි ඩීඑන්ඒ කට්ටලය වැනි වාණිජ කට්ටල, ඉහළ මට්ටමක අස්වැන්න සඳහා නිර්මාණය කර ඇත - පිරිසිදු ලෙස ප්රෝටීන, ලිපිඩ සහ වෙනත් අපවිත්ර ද්රව්ය .ලදායී වේ.
හුදකලා ඩීඑන්ඒ ගබඩා කිරීම සහ හැසිරවීම
D ඩීඑන්ඒ ගබඩා කිරීම සඳහා හොඳම භාවිතයන්
පිරිසිදු කළ පසු, ඩීඑන්ඒ ටෙනා බෆරය වැනි, orna බෆරය වැනි සුදුසු බෆරයක ගබඩා කළ යුතු අතර - 20 ° C හෝ - 80 ° C දක්වා වැඩි කාලයක් - කාලීන ගබඩා කිරීම. නිතර නිතර කැටි කරන්න නිතර නිතර මගහරින්න - ඒ.එන්.එන්.ඒ නිවාසයට හේතු විය හැකි බැවින් දියවන්න.
Dewnstraling destry යෙදුම් සඳහා ඩීඑන්ඒ අඛණ්ඩතාව පවත්වා ගැනීම
ඩීඑන්ඒ අඛණ්ඩතාව පවත්වා ගැනීම සඳහා, වන්ධ්යා, න්යෂ්ටික භාවිතා කරන්න - නොමිලේ නල සහ විසඳුම්. ඩීඑන්ඒ අපිරිසිදු හා ක්ලෝනකරණය, අනුක්රමය සහ PCR වැනි යෙදුම් සඳහා අපහාස කර ඇති බව මෙයින් සහතික කෙරේ.
ගැනබ්ලූකිිට්
ජියැන්ගු හිල්ගී, සුෂුහි සුසුහු හි පිහිටි සුසුහු හි පිහිටි සුසුහූහි සුසුහු හි පිහිටි සුසුෝෂෙය් හි සුෂුහි සුසුහු, සුෂ්ෂෝර් නගරයක් වන සුසුහරු, ෂෙන්ෂෝර් නගරයක් වන සුසුෂෝ, ෂෙන්ෂෙන් සහ ෂැංහයි හි නිෂ්පාදන ජාලයන් ද රටාව පුරා ව්යාප්ත වේ. එක්සත් ජනපදයේ උතුරු කැරොලිනා භූමිය මේ වන විට එහි ගෝලීය පැමිණීම තවදුරටත් ව්යාප්ත වෙමින් පවතී. න්යෂ්ටික අම්ල නිෂ්පාදන, සෙරුමය - නොමිලේ අත්හිටුවීමේ ක්රියාවලි, සංවෘත ක්රියාවලි සංවර්ධනය සහ QC පරීක්ෂණ සහ QC පරීක්ෂණ සහ QC පරීක්ෂණ. සෛලීය චිකිත්සක නවෝත්පාදනයන්හි සාර්ථකත්වය සහතික කිරීම සහතික කරමින් බ්ලූකිඅයි ක්රීඩා සැලසුම් කර ඇත.
පශ්චාත් කාලය: 2024 - 09 - 05 14:47:03
