Ko te DNA isOlating DNA mai i te E. Coli he tikanga nui i roto i te koiora koiora. Ka haere tenei tuhinga ki a koe i roto i te katoa o nga mahi, e whakarato ana i nga mahi taipitopito me nga whakamarama, me te whakarite kia mohio koe ki nga maatauranga me nga waahanga whaihua o te tikanga. Ahakoa he kairangahau koe, he tangata hou ranei ki te tapanga, ka whai waahi tenei aratohu.
Te whakarite i te aukati pūtau
● Kohinga o nga pūtau E. Coli
Ko te taahiraa tuatahi i roto i te DNA isOlating DNA mai i te E. Coli kei roto i te kohi i nga punaha huakita. Ko te tikanga ka hiahia te tipu o te E. Coli i roto i te reo wai e tika ana kia tae ra ano ki te waahanga tipu tupuna. He mea nui te waa na te mea ko nga pūtau i roto i tenei waahanga ka tino pai, ka ngawari ake hoki ki Lyse, ka puta ake i te hua DNA teitei ake.
● Te whakahoki i nga pūtau i roto i te kaihopu tika
Ko nga kohinga kua kohia ka hoki mai i roto i te kaihoroi e tika ana. Ko te kowhiringa noa ko te tris - EDTA (Te) Buffer, e awhina ana i te pono o te DNA i te waa efete ai. Ka mahi te poaka i te maha o nga kaupapa: ka tiimata te pH, ka whakarei ake i te DNA, me te whakarato i te taiao katote tino pai mo nga tauhohenga o muri.
Centrifugation ki nga pūtau pellet
● Nga tohu mo te centrifugation (tere me te waa)
I muri i te tono i nga pūtau, ka tukuna te aukati ki te centrifugation ki te kiri o nga pūtau. Ko te tere o te centrifugation me te waa he tohu nui. Ko te tikanga, ko te centrifugation ka mahia i te 4,000 - 6,000 g mo te 10 - 15 meneti i te 4 ° C. Ma tenei e whakarite kia hangaia nga pūtau i te pepa ka piri ki raro o te ngongo centrifuge.
● Te hiranga o te peita tika
He mea nui te taatai tika ki te wehe i nga pūtau mai i te tipu o te tipu me etahi atu waahanga whakarewa. He puna - Ko te peene i hangaia kia ngawari ake, kia pai ake ai te roa o te ngaro o nga pūtau a na reira, na, na, ko te hua DNA nui.
Tuhinga o mua
● Te tikanga mo te tangohanga supernatant
Ina whakauruhia nga pūtau, ko te supernatant (ko te wai i runga ake i te paera) me ata tangohia te kore e raru i te kiri pūtau. I te nuinga o te waa ka mahi ma te whakamahi i te micropipette. He mea nui ki te mahi i tenei mahi kia kaua e ngaro te ngaro o nga pūtau.
● Te whakarite iti o te mate kiri
Ko te whakarite kia iti ake te ngaro o te kiri pūtau ka uru ki te pipetting tupato a, mehemea e tika ana, he maha nga porowhita me te tangohanga o te rangatira. Ko te whaainga kia mau tonu i nga wa katoa e taea ana i te kiri mo te whakaora DNA.
Tuhinga o mua
● Ko nga waahanga o te otinga Lysis Lysis
Ko te otinga Luclei Lysis te nuinga o te waa (penei i te SDS), he kowhatu (penei i te Tris - Ko te kaihopu ka pakaru i te membrane pūtau me te konupae karihi, ka tukuna nga tuhinga o te pūtau, tae atu ki te DNA, ki te otinga.
● Te mahi i te wa e pakaru ana nga taiepa
Ko te otinga Lysis Lysis kaore noa iho i te membrane pūtau engari ka whakahekehia ano hoki nga pūtau me nga ngutu, ka takahi i nga pakitara o te pūtau me nga kowhatu karihi hei tuku i te DNA ki roto i te otinga.
Tuhinga o mua
● Ko te pipetting ngawari kia kore e kutikuti DNA
Ina tapirihia te otinga Lysy Lysis, me ata haere nga pūtau kia kore ai e kutikuti Dna. Ka taea e te kutikuti te pakaru i te DNA ki nga kongakonga iti, ka taea e te raru mo nga tono whakaheke iti e hiahia ana ki te teitei - Miihini - DNA Taumaha.
● Te whakarite i te whakahoutanga whakaoti
Ko te whakaoti i te tino whakatikatika e whakarite ana ko nga pūtau katoa he ahua rite tonu, te whakanui i te whakaoranga DNA. Ka taea tenei te whakatutukihia e te pipetting ngawari, te aukati ranei i te otinga i te tere iti.
Te whakauru ki nga pūtau lys
● Taumata pāmahana mo te ngoikore
Ko nga pūtau kua whakahoutia e whakaekea ana i te pāmahana motuhake hei whakarite i te lysis. I te nuinga o te waa ka mahi tenei i te 37 ° C ki te 55 ° C. Ko te pāmahana tika me te roanga ka taea te huri i te kawa me nga whakaritenga motuhake o te kete raranga DNA e whakamahia ana.
● Te roa e hiahiatia ana mo te Lysis whai hua
Ko te roanga o te waa mo te whakaurunga i waenga i te 20 ki te 30 meneti, engari ka taea te whakatika i runga i te kaha o te pūtau o te pūtau o te pūtau o te pūtau lysis. Ko te whakaurunga roa ka hiahiatia kia oti mo te lysis oti engari me taurite ki te mate o te ngoikore o te DNA.
Te whakamahana ki te pāmahana rūma
● Te hiranga o te makariri totika
I muri i te haehae, ka matara te lysate ki te pāmahana o te rūma. Ka awhina te makariri ki te whakatuu i te DNA me te whakaiti i te tupono o te ohorere wera, ka taea pea te whakakore i te DNA.
● Nga paanga ki te DNA me te otaota cellular
Ko te whakamahana ki te pāmahana o te rūma ka taea e te otaota pūtau te aukati, te ngawari ki te wehe i te DNA i nga waahanga o muri. Ka awhina hoki tenei ki te whakaū i nga mahi enanoha me te whakahaere i te RNA na RNASE Mail.
Tuhinga o mua
● Te kaupapa o te Rnase i roto i te tikanga
Ka taapirihia te otinga Rnase ki te whakaheke i te rna, ka taea pea te CO - Purea me te DNA me te wawao i nga tono whakaheke. RNASELL WHAKAMAHI KI TE RNA, KI TE WHAKAMAHI I TE WHAKAMAHI I TE WHAKAMAHI.
● Te aukati i te paitini o te rna
Ko te aukati i te aukati i te RNA he mea nui mo nga tono e hiahia ana ki te DNA parakore, penei i te PCR me te taapiri. Ko te maimoatanga Rnase e whakarite kia waatea te DNA motuhake mai i nga poke o te RNA.
Purenga o te dna
● Nga tikanga mo te wehe i te DNA mai i etahi atu waahanga pūkoro
He maha nga tikanga ka taea te whakamahi ki te horoi i te DNA mai i te Lysate. Kei roto i enei ko te Phenom - Tangohanga a Chloroform, te whakarewa ethanol, me te whakamahi i nga kaihokohoko e. Coli DNA. Kei ia tikanga nga tikanga me ona kaute, me nga kete arumoni e tuku ana i te waatea me nga hua rite.
● Whakaaro mo te purea a DNA
Ko te ma te whakaaro nui mo te angitu o nga tono whakahekeheke. Ko nga kete arumoni, penei i te rongoa pūtau, coli dna kete, kua hangaia hei whakaputa i te nui o te purea me te tango i nga pūmua, nga ngutu, me etahi atu poke.
Te rokiroki me te whakahaere i te DNA motuhake
● Nga mahi pai mo te penapena DNA
Ka purea, me penapena te DNA ki te kaihoroi tika, penei i a Te Buffer, i te 20 ° C ranei - 80 ° C mo te roa - A ape i nga huringa maha - i nga huringa thatw i te mea ka taea e ratou te whakararu DNA.
● Te pupuri i te pono o te DNA mo nga tono o raro
Hei pupuri i te tapatahi o te DNA, whakamahia te maamaa, te karihi - ngongo koreutu me nga otinga. Ma tenei e whakarite kia noho tonu te DNA me te pai ki nga tono penei i te hono, te taapiri, me te PCR.
MōPoikiri
I whakapumautia e Jiangsu Hillgene tona tari matua (10,000㎡ GPM tipu me te R & D Court) i Suzhou, kei Suzhou te whenua ataahua o Taihu, e rua nga papaa i Shenzhen me Shanghai. Ko te papa o Te Tai Tokerau o Te Tai Tokerau i te US e hanga ana i tenei wa, kei te horapa ano i tona aroaro o te ao. Kua hangaia e Hillgene tetahi huarahi e whakaatu ana mo te whakawhanake i nga kupu rongoa pūkoro, mai i nga waahanga mo te tuku, me nga papaa - Serum - Whakawhanake Whakawhanake Katia, me te Whakangungu Whakawhitiwhiti Kua hangaia nga hua BlueKit mo te whakahaere kounga, ko te whakarite i te angitu o nga hangarau haumanu pūtau.
Te Wā Whakamutunga: 2024 - 09 - 05 14:47:03
