Pichia Pastoris HCP (proteinina ho an'ny finday)
Pichia Pastoris HCP (proteinina ho an'ny finday)
✓ Pichia Pastoris - Mahasoa manokana - Tsy misy lakroa - Fihenjana amin'ny Cho / HCPs
✓ Vonona - To - fampiasana - Tsy misy santionany takiana
Ampiasaina ampiasaina
Ity kitapo ity dia natao ho an'ny fametahana ny valan-java-misy amin'ny proteinina finday (hcp) ao amin'ny vokatra biocharmaceutical izay avy amin'ny Pichia pastoris Fitsarana (e.g., GS115, X33), mampiasa iray - Step Enzyme - mifandray immunosorbent Assay (Elisa). Ho an'ny fampiasana fikarohana ihany. Tsy ho an'ny tanjona diagnostika.
Fitsipiky ny fanaraha-maso
Ny kitapo dia mampiasa a sandwich Elisa Fomba:
-
Coating: Ny lavadrano microplate dia mialoha - voahosotra amin'ny antikanjo polyclonal manohitra Pichia pastoris Hcps.
-
Incubation: Nampiana ny santionany / calibrator, narahin'ny HRP - Polyclonal polyclonal anti -Pichia pastoris HCP Antibodies.
-
mamantatra: Rehefa avy nanasa, TMB Substic dia ampiana ho an'ny fampandrosoana loko. Nitsahatra ny fihetsiky ny fanehoan-kevitra ary refesina ny fisondrotana 450 NM.
-
Quantitation: Ny fifantohana HCP dia kajy avy amin'ny curve mahazatra (absorbance α hcp concentration).
Endri-javatra fototra
-
Tsy misy santionany takiana (Ny fanamarinana ihany no ilaina).
-
Protocol miolakolaka: Dingana kely, valiny haingana (<2 ora).
-
Famaritana sy fahatokisana avo lenta: Optimized ho an'ny Pichia pastoris Hcps.
Teknika teknika
-
Sampana mifanentana: Sekoly Kolontsaina sela, biolojika voadio.
-
Range Dynamic: 1-100 NG / ML (mahazatra).
-
Fitsipika mifehy ny lalàna: Mety amin'ny fampandrosoana ny fampandrosoana sy ny famotsorana ny famotsorana ny GMP LOT.
Fomba fampiasana1. ExamiLibration
-
Ento ny singa rehetra amin'ny mari-pana amin'ny efitrano (≥20 min).
2. SAMPLE / ADDIDE ADDUSTION-
Manampia santionany / calibrator: 100 μl / tsara
-
Ampio ny 1x Enzyme - AntiBugated AntiBody: 100 μl / tsara (jereo angano ①)
3. Incubation-
Afo ao amin'ny RT, voaro amin'ny hazavana, 600 rpm ho an'ny 3 h (jereo angano ③)
4. Fanasana-
Sasao 1: 300 μl / Well 1x Buffer (toerana misy ny takelaka)
-
Sasao 2 - 5: 300 μl / tsara 1x Buffer, 5 WASHES
-
Maina maina: Aorian'ny fanasana farany, takelaka mitataovozavo amin'ny taratasy
5. TMB substrate distorce-
Ampio TMB: 100 μl / tsara
-
mampivelatra: 10 min ao amin'ny RT (Voaro amin'ny hazavana)
6. Ajanony ny fanehoan-kevitra sy famakiana-
Ampio ny vahaolana ajanony: 50 μl / tsara
-
Mitsangàna: 5 min
-
HAMAKY: Od amin'ny 450 nm (reference 620 nm)
-
singa fototra | Vokatra No. | famaritana | Description |
---|---|---|---|
Pre - coated anti - pichia hcp mikrôloplate | Pna015 | 8 Wells × 12 tapa | Pre - voahosotra amin'ny polyclonal polyclonal anti -Pichia pastoris HCP Antibodies. Nasiana tombo-kase amin'ny foza misy desiccant. Fivarotana voaro amin'ny hazavana. |
Pichia hcp calibrator | Pnb015 | Vava 2 | Lyophilized vovoka. Miverina amin'ny 500 μl calibrator Diluent (PNC002). Avelao ny 5-10 min ho an'ny fanimbana (tokony ho mazava ny vahaolana). Fivarotana voaro amin'ny hazavana. |
Calibrator diluent | PNC002 | 1.5 ml × 1 Tube | Vahaolana mazava ho fanamafisana ny calibrator Pichia HCP. |
Assay Diluent | PNE006 | 25 ml × 2 tavoahangy | Ho an'ny mpandeha an-tsokosoko, santionany, ary enzimme - antibody voarindra. Manamarina ny anton-droa tsara indrindra ho an'ny santionany vaovao. |
Manasa buffer (10 × Confentrate) | PNF001 | 25 ml × 2 tavoahangy | Ho an'ny fanasana takelaka. Ny kristaly dia mety misy amin'ny hafanana ambany - mihena amin'ny 37 ° C alohan'ny fampiasana. Dilute 10 × misy rano ultrapure. |
HRP - Conjugated Anti - Pichia HCP Antibody (100 ×) | PNN009 | 120 μl × 1 Tube | Anjo Polyclonal ondry. Dilute 100 × miaraka amin'i Assay Diluent alohan'ny fampiasana. Fivarotana voaro amin'ny hazavana. |
TMB substrate | PND004 | 12 tavoahangy 12 ml × 1 | Mitovitovy amin'ny mari-pana amin'ny efitrano (≥20 min) alohan'ny fampiasana. Fivarotana voaro amin'ny hazavana. |
Ajanony ny vahaolana | PNI002 | 6 ml × 1 tottle | Misy hcl. Manaova goggles ary manalavitra ny fifandraisana amin'ny hoditra. |
Sarimihetsika famehezana | Pnk001 | Sheet 3 | Ho fanakonana ny tsipika microuptate mba hisorohana ny fandotoana sy ny helo. |
Fampahalalana momba ny fandefasana
Manolotra fitaterana vatsivoom-bolo amin'ny baiko rehetra izahay. Matetika ny baikonao dia ho tonga ao anatin'ny 5 - 7 andro fandraharahana any Etazonia ary ao anatin'ny 10 andro fiasana ho an'ny firenen-kafa. Na izany aza, azafady mba tsarovy fa ny fandefasana any ambanivohitra dia mety hihena kely kokoa.
Fotoam-pandefasana: Ny baiko dia mazàna nozarina ao anatin'ny 1 - 3 andro fandraharahana. Vantany vao nalefa ny baikonao dia hahazo mailaka fanamafisana ianao miaraka amin'ny fampahalalana momba ny fanaraha-maso.
Fampahalalana manan-danja
Ny fanodinana baiko: Rehefa avy nandoa ny baiko dia mila fotoana kely ny trano fitehirizam-bokatra ho antsika mba hanodinana ny baikonao. Hahazo fampandrenesana ianao raha vao nalefa ny baikonao.
Fotoana fandefasana: Amin'ny ankamaroan'ny tranga, ny fonosana dia hatolotra ao anatin'ny fotoana tombanana. Na izany aza, ny datin'ny fandefasana tena dia mety hisy fiantraikany amin'ny fandaminana sidina, ny toetr'andro ary ny toe-javatra ivelany hafa. Ho lava kokoa noho ny mahazatra ny fandefasana fotoana Azafady mba jereo ny fampahalalana momba ny fanaraha-maso ho an'ny daty fanaterana marina indrindra.
Olana momba ny fandefasana: Raha hitanao fa tsy mbola natolotra tao anatin'ny fotoana voatondro ny fonosanao; Ny fampahalalana momba ny fanaraha-maso dia mampiseho fa efa voavonjy ilay fonosana fa tsy mbola nandray izany ianao; Na ny fonosanao dia misy zavatra tsy hita na diso na olana hafa, azafady mba mifandraisa aminay ny serivisy amin'ny mpanjifa ao anatin'ny 7 andro amin'ny datin'ny fandoavam-bola mba hahafahantsika miresaka haingana ireo olana ireo.
Baiko fanaraha-maso
Vantany vao alefa ny baikonao dia hahazo mailaka misy isa fanenjehana sy rohy iray ianao hanaraha-maso ny fandefasana anao.
Azonao atao ihany koa ny manara-maso mivantana ny baikonao mivantana ao amin'ny tranokalanay amin'ny alàlan'ny fidirana amin'ny kaontinao ary hijery ny tantaran'ny baikonao.
Fameperana ny fandefasana
Azafady fenoy ny antsipirihany ny adiresy an-dalambe, fa tsy boaty PO na adiresy miaramila (Apo). Raha tsy izany, dia mila mampiasa EMS isika amin'ny fandefasana (miadana noho ny hafa ity, midina manodidina ny 1 - 2 volana na lava kokoa).
Adidin'ny Customs sy Politika momba ny hetra
Aza adino fa misy adidy amin'ny fomba amam-panao, hetra, na ny saram-pandefasana fanafarana mandritra ny fandefasana no andraikitry ny mpividy. Ireo fiampangana ireo dia miovaova arakaraka ny firenen-dehibe ary voafaritry ny manam-pahefana ao an-toerana.
Amin'ny fividianana ny tranokalanay dia manaiky ny handoa adidy na hetra azo ampiharina amin'ny baikonao ianao. Tsy tompon'andraikitra amin'ny fahatarana nateraky ny fanadiovana ny fomba amam-panao izahay.
Politika Pickup Package
Vantany vao tonga tao amin'ny toerana pickup na toerana fandefasana voatondro ny baikonao, azafady mba hiantoka ny fanangonana haingana. Raha tsy alaina ao anatin'ny fotoana voatondro ny fonosana dia handefa fampahatsiahivana amin'ny alàlan'ny mailaka na SMS izahay. Na izany aza, raha tsy angonina ao anatin'ny vanim-potoana voafaritra ny fonosana, ary misy fatiantoka na fahasimbana mitranga vokatr'izany, dia ho tompon'andraikitra ny mpividy. Mampahatsiahy anao ny hanangona ny fonosanao haingana izahay mba hialana amin'ny olana mety hitranga.
Fanamarihana: Rehefa latsaka ao ambanin'ny sokajy manokana ny vokatra eto amintsika, dia ny fiverenana ary ny famerenam-bola dia tsy ekena.